Atividade antimicrobiana do extrato de alho (Allium sativum L.) sobre o crescimento de Cronobacter sakazakii

Abstract

Cronobacter sakazakii é um patógeno oportunista emergente associado a infecções graves em populações vulneráveis, incluindo neonatos, indivíduos imunocomprometidos e idosos. Sua capacidade de sobreviver em alimentos secos e ambientes de processamento representa um desafio para a segurança dos alimentos e reforça a necessidade de estratégias alternativas para seu controle. Nesse contexto, este estudo avaliou a atividade antimicrobiana do extrato aquoso de alho (Allium sativum L.) sobre o crescimento da cepa C. sakazakii INCQS P4777, previamente isolada de farinha de milho. O efeito antimicrobiano foi avaliado em caldo Brain Heart Infusion (BHI) contendo extrato nas concentrações finais de 1%, 2,5% e 5%, além do controle sem extrato. O crescimento bacteriano foi monitorado por densidade óptica a 600 nm (DO600) ao longo de 2 horas de cultivo a 30 oC. A concentração de 1% foi selecionada para avaliação da viabilidade celular por contagem de unidades formadoras de colônia (UFC) em ágar Violet Red Bile Glucose (VRBG), e colônias isoladas foram confirmadas por PCR convencional utilizando iniciadores específicos para o gene rpoB de C. sakazakii. O cultivo controle de C. sakazakii apresentou valor médio de DO600 de 0,421 após 2 horas de crescimento a 30 oC, enquanto os cultivos com extrato aquoso de alho nas concentrações de 1%, 2,5% e 5% apresentaram valores médios de DO600 de 0,112, 0,045 e 0,028, respectivamente, indicando crescimento bacteriano mais lento na presença do extrato de alho. Na avaliação da viabilidade celular, a cultura contendo extrato aquoso de alho a 1% apresentou menor contagem de C. sakazakii em comparação ao controle após 2 horas de incubação, com médias de 7,52 ± 0,02 log10 UFC/mL no controle e 6,79 ± 0,06 log10 UFC/mL na presença do extrato de alho, correspondendo a uma diferença aproximada de 0,73 log10 UFC/mL entre as condições. A PCR convencional confirmou a identidade das colônias isoladas como C. sakazakii. Os resultados indicam potencial antimicrobiano do extrato aquoso de alho em caldo BHI e fornecem subsídios para estudos posteriores sobre sua atividade em outras condições experimentais e em matrizes alimentares.

Abstract: Cronobacter sakazakii is an emerging opportunistic pathogen associated with severe infections in vulnerable populations, including neonates, immunocompromised individuals, and older adults. Its ability to survive in dry foods and food processing environments poses a challenge to food safety and highlights the need for alternative control strategies. In this context, this study evaluated the antimicrobial activity of aqueous garlic extract (Allium sativum L.) against the growth of C. sakazakii strain INCQS P4777, previously isolated from corn flour. The antimicrobial effect was evaluated in Brain Heart Infusion (BHI) broth containing aqueous garlic extract at final concentrations of 1%, 2.5%, and 5%, in addition to a control without extract. Bacterial growth was monitored by measuring optical density at 600 nm (OD600) during a 2-hour incubation period at 30 °C. The 1% concentration was selected for cell viability assessment by colony-forming unit (CFU) counting on Violet Red Bile Glucose (VRBG) agar, and isolated colonies were confirmed by conventional PCR using primers specific for the rpoB gene of C. sakazakii. After 2 hours of incubation at 30 °C, the control culture showed a mean OD600 value of 0.421, whereas cultures treated with aqueous garlic extract at concentrations of 1%, 2.5%, and 5% showed mean OD600 values of 0.112, 0.045, and 0.028, respectively, indicating slow bacterial growth with garlic extract. In the cell viability assay, the culture containing 1% aqueous garlic extract showed a lower viable C. sakazakii count than the control 2 hours after incubation, with mean values of 7.52 ± 0.02 log10 CFU/mL in the control and 6.79 ± 0.06 log10 CFU/mL in the presence of the extract, corresponding to an approximate difference of 0.73 log10 CFU/mL between the conditions. Conventional PCR confirmed the identity of the isolated colonies as C. sakazakii. Overall, the results indicate that aqueous garlic extract has antimicrobial potential against C. sakazakii under the experimental conditions evaluated in BHI broth. Further studies are needed to investigate its activity under other experimental conditions and in food matrices.