Determinação de ácido fólico em suplemento alimentar por microextração líquidolíquido dispersiva com solvente eutético profundo

Abstract

O ácido fólico é uma vitamina hidrossolúvel que desempenha um papel biológico importante no metabolismo humano. Uma das estratégias de saúde pública utilizadas para garantir a ingestão de micronutrientes é a ingestão de ácido fólico na forma de suplementos alimentares. No Brasil o método oficial para suplementos alimentares contendo ácido fólico em comprimidos é o método cromatográfico, que embora apresente alta precisão e sensibilidade, tem elevado custo a alta produção de resíduos que impõem limitações socioeconômicas e ambientais. Neste trabalho foi desenvolvido um método para quantificação de ácido fólico em suplemento alimentar, norteado pelos parâmetros da química verde utilizando a técnica de microextração líquido-líquido dispersiva com auxílio de agitação por vórtex, solvente eutético profundo a base de cloreto de trioctilmetilamônio e álcool isoamílico e detecção por espectrofotometria UV-Vis. O meio de extração com solvente eutético profundo exibiu aumento da absortividade molar do ácido fólico a 370 nm e aumento da sensibilidade analítica devido as propriedades de concentração do ácido fólico pelo solvente eutético profundo. O método desenvolvido apresentou faixa de trabalho de 1,0 a 20,0 µg.mL-1, coeficiente de correlação (r) de 0,9991, homocedasticidade avaliada pelo teste de Cochran e distribuição normal dos resíduos de acordo com o teste de Shapiro Wilk. A análise das variâncias entre as curvas com e sem matriz, pelo teste F, demonstrou a seletividade do método, por não haver efeito de matriz. O limite de detecção foi de 0,26 µg.mL-1 e o de quantificação foi de 0,79 µg.mL-1. Os valores de exatidão variaram de 82 a 103 % e a precisão variou de 0,3 a 1,2 %. O método desenvolvido utilizando microextração líquido-líquido dispersiva com solvente eutético profundo apresentou recuperação relativa de 96,87% em comparação com o método de referência cromatográfico para análise de ácido fólico em suplemento alimentar e não apresentou diferença estatística quando verificado pelos testes F e t (Student) com 95% de confiabilidade. A ferramenta AGREE, permitiu classificar o método como verde estando em acordo com os princípios da química verde, sendo classificado como um método sustentável e de baixo risco para o meio ambiente e o analista.

Abstract: Folic acid is a water-soluble vitamin that plays an important biological role in human metabolism, especially during pregnancy, reducing the occurrence of congenital malformations related to the closure of the neural tube . One of the public health strategies used to ensure micronutrient intake is folic acid ingestion in the form of dietary supplements. In Brazil, the official method for food supplements in tablets containing folic acid is the chromatographic method which, although it has high precision and sensitivity, has a high cost and produces a lot of waste which imposes socio-economic and environmental limitations. In this work, a method was developed for the quantification of folic acid in dietary supplements, guided by the parameters of green chemistry using a vortex assisted dispersive liquid-liquid microextraction technique and a deep eutectic solvent based on trioctylmethylammonium chloride and isoamyl alcohol with detection by UV-Vis spectrophotometry. The extraction medium with deep eutectic solvent showed an increase in the molar absorptivity of folic acid at 370 nm and increased analytical sensitivity due to the concentration properties of folic acid by the deep eutectic solvent. The developed method showed a working range of 1.0 to 20.0 µg.mL-1, a correlation coefficient (r) of 0.9991, homoscedasticity evaluated by the Cochran test and normal distribution of the residues according to the Shapiro Wilk test. The analysis of variance between the curves with and without the matrix, using the F-test, demonstrated selectivity of the method, as there was no matrix effect. The detection limit was 0.26 µg.mL-1 and the quantification limit was 0.79 µg.mL-1. Accuracy values ranged from 82 to 103 % and precision ranged from 0.3 to 1.2 %. The method developed using dispersive liquid-liquid microextraction with deep eutectic solvent showed a relative recovery of 96.87% compared to the chromatographic reference method for analyzing folic acid in dietary supplements and showed no statistical difference when verified by the F and t (Student) tests with 95% reliability. The AGREE tool allowed the method to be classified as green, in accordance with the principles of green chemistry, being classified as a sustainable method with low risk for the environment and the analyst.