Uso de óleos essenciais de capim-carona (Elionurus muticus) e capim-limão (Cymbopogon citratus) sobre o desenvolvimento do fungo Sclerotinia sclerotiorum

Abstract

O fungo Sclerotinia sclerotiorum é o agente causador do mofo branco, uma doença que afeta diversas culturas agrícolas e resulta em perdas econômicas. O uso de óleos essenciais como agentes antifúngicos destaca-se como alternativa sustentável para o controle dessa doença. Este trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos dos óleos essenciais de capim-carona (Elionurus muticus) e capim-limão (Cymbopogon citratus) na inibição do crescimento micelial e germinação de escleródios de S. sclerotiorum. Para avaliar o crescimento micelial, foram utilizadas doses crescentes de óleos essenciais (0, 2,5, 5, 7,5, 10 e 20 μL), aplicados em chumaços de algodão fixados na tampa da placa de Petri. Em meio BDA foi adicionado um disco de micélio de 5 mm. O ensaio foi delineamento inteiramente casualizado (DIC). Os dados foram calculados para Área Abaixo da Curva de Crescimento Micelial (AACCM) e Índice de Velocidade de Crescimento Micelial (IVCM) e analisados por regressão com 5% de significância no software R. A inibição dos escleródios foi testada por imersão e volatilização. O método de imersão foi testado na concentração de 4000 ppm, sendo adicionado uma alíquota de 4 ml dos óleos diluídos sobre o meio AA (ágar-ágar) já solidificado e acrescido cinco escleródios de maneira equidistantes. No ensaio de volatilização foi testado a concentração de 100 µL dos óleos essenciais de capim-carona e capim-limão em placas de Petri, sendo pipetado as alíquotas em chumaços de algodão fixados na tampa das placas de Petri. Foram adicionados cinco escleródios de forma equidistantes em meio AA (ágar-ágar) já solidificado. O parâmetro de avaliação da inibição dos escleródios foi a germinação ou não da estrutura. Os dados dos testes de imersão e volatilização foram analisados pelo Teste G-rho de Harrington e Fleming (1982) para comparar os tratamentos com a testemunha, e a análise de sobrevivência foi realizada no software R, gerando as curvas de Kaplan-Meier com 5% de significância. Os escleródios não germinados foram submetidos ao teste de Trifenil Cloreto de Tetrazólio (TCT) e Azul de Bromofenol com o propósito de verificar a viabilidade dos escleródios de S. sclerotiorum. Os escleródios inviabilizados apresentaram 100% de ausência na atividade celular no teste de TCT e em Azul de Bromofenol no capim-carona em imersão e volatilização. Já o capim-limão apresentou inviabilidade parcial para ambos os testes. Os resultados da AACCM indicaram que o óleo essencial de capim-limão apresentou 87,67% de inibição do crescimento micelial na dose de 5,79 µL, enquanto o capim-carona obteve 76,5% de inibição apena na dose de 2,78 µL. Nos dados obtidos para IVCM, o capim-limão na dose 7,08 µL teve redução de crescimento micelial em 2,14 cm/dia e o capim-carona por sua vez, na dose 2,97 µL, teve redução de crescimento micelial em 2,29 cm/dia. No teste de imersão, o capim-carona resultou em 62,5% de escleródios inviabilizados, enquanto o capim-limão alcançou 85% de inviabilidade. O efeito da volatilização foi menos eficaz, com capim-carona e capim-limão inibindo até 6% e 10% da germinação dos escleródios, respectivamente. Os resultados evidenciam o potencial antifúngico dos óleos essenciais de E. muticus e C. citratus como alternativas promissoras no manejo sustentável de S. sclerotiorum in vitro.

The fungus Sclerotinia sclerotiorum is the causal agent of white mold, a disease that affects various agricultural crops and results in economic losses. The use of essential oils as antifungal agents stands out as a sustainable alternative for controlling this disease. This study aimed to evaluate the effects of essential oils from Elionurus muticus (capim-carona) and Cymbopogon citratus (lemongrass) on the inhibition of mycelial growth and sclerotia germination of S. sclerotiorum. To evaluate mycelial growth, increasing doses of essential oils (0, 2.5, 5, 7.5, 10, and 20 μL) were applied to cotton swabs fixed to the lid of Petri dishes. A 5 mm mycelial disk was added to PDA (potato dextrose agar) medium. The experiment followed a completely randomized design (CRD). Data were calculated for the Area Under the Mycelial Growth Curve (AUMGC) and Mycelial Growth Rate Index (MGRI), and analyzed by regression at a 5% significance level using R software. Sclerotia inhibition was tested by immersion and volatilization. The immersion method used a concentration of 4000 ppm, with a 4 mL aliquot of the diluted oils added onto solidified AA (agar-agar) medium, and five sclerotia placed equidistantly. In the volatilization assay, a concentration of 100 µL of essential oils from capimcarona and lemongrass was tested in Petri dishes, with the aliquots pipetted onto cotton swabs fixed to the lids. Five equidistant sclerotia were placed on solidified AA medium. The parameter for evaluating sclerotia inhibition was whether or not germination occurred. Data from immersion and volatilization tests were analyzed using the G-rho test by Harrington and Fleming (1982) to compare treatments with the control, and survival analysis was conducted in R software, generating Kaplan-Meier curves at a 5% significance level. Non-germinated sclerotia were subjected to the Triphenyl Tetrazolium Chloride (TTC) and Bromophenol Blue tests to verify the viability of S. sclerotiorum sclerotia. Non-viable sclerotia showed 100% absence of cellular activity in the TTC and Bromophenol Blue tests for capim-carona in both immersion and volatilization. Lemongrass, however, showed partial inviability in both tests. The AUMGC results indicated that lemongrass essential oil achieved 87.67% mycelial growth inhibition at a dose of 5.79 µL, while capim-carona achieved 76.5% inhibition at a dose of only 2.78 µL. Regarding MGRI, lemongrass at 7.08 µL reduced mycelial growth by 2.14 cm/day, while capim-carona at 2.97 µL reduced growth by 2.29 cm/day. In the immersion test, capimcarona resulted in 62.5% non-viable sclerotia, while lemongrass reached 85% inviability. The volatilization effect was less effective, with capim-carona and lemongrass inhibiting up to 6% and 10% of sclerotia germination, respectively. The results highlight the antifungal potential of the essential oils of E. muticus and C. citratus as promising alternatives for the sustainable in vitro management of S. sclerotiorum.