Trichoderma spp. como agente de controle biológico contra Sclerotinia sclerotiorum e Sclerotium rolfsii: Avaliação de eficácia e mecanismos de ação

Abstract

O mofo-branco e a podridão do colo, causados pelos fungos Sclerotinia sclerotiorum e Sclerotium rolfsii, são doenças graves que acometem os grandes cultivos. Embora o controle mais comum seja realizado com fungicidas químicos, a crescente busca por práticas mais sustentáveis tem impulsionado o uso do controle biológico, que vem ganhando destaque. O fungo Trichoderma se mostra uma alternativa promissora, reduzindo o inóculo dos fitopatógenos com eficiência e especificidade, além de diminuir o impacto ambiental. Diante disso, o presente estudo teve como objetivo avaliar in vitro o potencial de controle dos fungos S. sclerotiorum e S. rolfsii submetidos a diferentes isolados de Trichoderma coletados na região de Brunópolis-SC. Foram analisados oito isolados identificados 1A; 36A; 98A; 99A; 111B; 112B; 36B; 102 e um isolado do produto comercial Thichodermil®. O teste de inibição do crescimento micelial após a exposição aos compostos orgânicos voláteis (COVs ) consistiu na utilização de dois fundos de placa de Petri, contendo meio BDA, um disco de micélio do fungo fitopatogênico e um disco de micélio colonizados por Trichoderma spp., as mesmas foram sobrepostas uma à outra, formando uma atmosfera compartilhada. Quanto ao teste de inibição do crescimento micelial após a exposição aos compostos orgânicos não voláteis (COÑVs), consistiu-se da raspagem do micélio do fungo antagonista com 10 dias de cultivo, filtrados com o auxílio de gazes e adicionado juntamente com meio B.D.A a uma proporção de 30%. Para ambos, os dados obtidos foram calculados a porcentagem de inibição e porcentagem de redução da velocidade do crescimento. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com 10 tratamentos e 5 repetições. As médias obtidas foram comparadas pelo teste de Scott-Knott, ao nível de significância de 5%. Para avaliação da germinação miceliogênica, seis escleródios produzidos em BDA com 30 dias, foram transferidos para placas contendo colônias de Trichoderma e incubadas por 7 e 20 dias para S. rolfsii e 20 dias para S. sclerotiorum. A viabilidade foi avaliada pelo teste de Trifenil Cloreto de Tetrazólio (0,5%), julgado viável os escleródios de coloração rosada e não viável os escleródios amarelados. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com 10 tratamentos e 4 repetições. Os resultados obtidos foram comparados ao teste qui-quadrado. Apesar de alguns isolados não terem demonstrado potencial antagônico sobre S. sclerotiorum quando submetidos aos COVs, a grande maioria mostrou resultados satisfatórios no controle do S. rolfsii. Já os COÑVs, para o S. rolfsii os isolados que mais se destacaram foram TCOM e 36B, ambos com aproximadamente 50% de controle total. Já para o fungo S. sclerotiorum houve um maior número de tratamentos satisfatórios, sendo estes 111B, TCOM, 99A e 98A, que obtiveram resultados superiores a 50% de controle. Quanto a redução da viabilidade dos escleródios, com 7 dias nenhum dos isolados demonstrou controle, porém, com 20 dias de avaliação para ambos os fungos fitopatogênicos, o isolado 1A e 102B demonstraram capacidade de inibição dos escleródios. Os resultados obtidos para ambos os testes e fungos fitopatogênicos foram satisfatórios, evidenciando um grande potencial de controle dos isolados encontrados na região de Santa Catarina.

White mold and collar rot, caused by the fungi Sclerotinia sclerotiorum and Sclerotium rolfsii, are serious diseases affecting large-scale crops. The most common control method is the use of chemical fungicides, but due to the demand for more sustainable practices, biological control has gained prominence. The fungus Trichoderma presents itself as a promising alternative, efficiently and specifically reducing pathogen inoculum while also reducing environmental impact. Therefore, the objective of this study was to evaluate in vitro the control potential of S. sclerotiorum and S. rolfsii subjected to different isolates of Trichoderma collected in the region of Brunópolis, SC. Eight isolates were analyzed, identified as 1A, 36A, 98A, 99A, 111B, 112B, 36B, 102, and a commercial product isolate, Trichodermil®. The mycelial growth inhibition test after exposure to volatile organic compounds (VOCs) involved using two Petri dish bases containing PDA medium, one disk of the phytopathogenic fungus mycelium and one disk colonized by Trichoderma spp.; they were overlaid, forming a shared atmosphere. The mycelial growth inhibition test after exposure to non-volatile organic compounds (NVOCs) involved scraping the antagonist fungus mycelium after 10 days of cultivation, filtering it with gauze, and adding it to PDA medium at a 30% proportion. For both, the inhibition percentage and growth rate reduction percentage were calculated. A completely randomized design with 10 treatments and 5 repetitions was used. The means obtained were compared by the Scott-Knott test at a 5% significance level. For myceliogenic germination evaluation, six sclerotia produced in PDA for 30 days were transferred to plates containing Trichoderma colonies and incubated for 7 days for S. rolfsii and 20 days for S. sclerotiorum. Viability was assessed by the Tetrazolium Triphenyl Chloride (0.5%) test, where viable sclerotia were pink and non-viable sclerotia were yellow. The experimental design was completely randomized with 10 treatments and 4 repetitions. The results were compared using the chi-square test. Although some isolates did not demonstrate antagonistic potential against S. sclerotiorum when exposed to VOCs, the majority showed satisfactory results in controlling S. rolfsii. For NVOCs, the isolates that stood out for S. rolfsii were TCOM and 36B, both achieving approximately 50% total control. For S. sclerotiorum, a greater number of treatments were satisfactory, namely 111B, TCOM, 99A, and 98A, with control results above 50%. Regarding the reduction in sclerotia viability, none of the isolates showed control after 7 days; however, with 20 days of evaluation for both phytopathogenic fungi, isolates 1A and 102B demonstrated sclerotia inhibition capability. The results obtained for both tests and phytopathogenic fungi were satisfactory, showing a great control potential of the isolates found in the Santa Catarina region.