Foodprint: rastreabilidade e rotulagem de produtos geneticamente editados na cadeia alimentar (fase 3)

Abstract

Os protoplastos, servem como uma matriz celular útil no melhoramento de plantas pois possuem todas as organelas, que sob condições adequadas podem regenerar estruturas conhecidas como calos. A indução da abertura dos poros da membrana celular de protoplastos e exposição a elementos genéticos construídos teoricamente, permite que, os protoplastos sejam utilizados em sistemas de cultura de regeneração. Exploramos um método de cultivo de protoplastos de soja, visando ampliar o estudo de sobrevivência, regeneração e escalabilidade de protoplastos no melhoramento genético para introdução de características de interesse pelo sistema de edição CRISPR-Cas9. As etapas experimentais foram realizadas no Laboratório de Fisiologia do Desenvolvimento e Genética Vegetal da UFSC. As principais atividades incluíram a germinação de sementes de soja e o isolamento de protoplastos, seguido pela introdução dessas células em meio de cultura baseado no método Kao e Michayluk (1975), utilizando o sistema de cultura em gotas de agarose. O protocolo de isolamento de protoplastos foi aprimorado para aumentar a densidade de protoplastos por mL, entretanto, a viabilidade dessas células após o isolamento e sua sobrevivência no meio de cultura Kao e Michayluk (1975) sob as condições microscópicas de amostragem analisadas precisam ser aprimoradas. Isso sugere a necessidade de explorar diferentes abordagens para o cultivo de protoplastos. Destacamos os desafios enfrentados na criação de um protocolo eficaz para a regeneração de protoplastos de soja competentes para regeneração, visando a sua aplicação no melhoramento genético da soja. É evidente que melhorias nos protocolos de cultivo são necessárias para superar esses desafios.