Propagação in vitro de goiabeira-serrana (Acca sellowiana, Myrtaceae): Efeito de Thidiazuron (TDZ) na multiplicação em diferentes meios de cultura

Abstract

A goiabeira-serrana (Acca sellowiana (O. Berg.) Burret é uma espécie nativa dos biomas Mata Atlântica e Pampa, os quais vem sofrendo intensas pressões antrópicas que acabam levando à perda de áreas de vegetação nativa e de biodiversidade. Com isso, vem sendo buscados métodos para conservação e propagação desta espécie, sendo a micropropagação uma das alternativas viáveis. Entretanto, a cultura de tecidos precisa de aprimoramento das técnicas disponíveis para serem utilizadas rotineiramente. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência das diferentes concentrações de Thidiazuron (TDZ) e dos diferentes meios de cultura nas respostas morfogênicas da goiaba-serrana. As análises foram compostas por dois experimentos, sendo o primeiro avaliando o efeito de diferentes concentrações de TDZ e o segundo avaliando o efeito de três meios de cultura (MS, WPM e LPm) nas diferentes concentrações de TDZ. As sementes utilizadas foram retiradas manualmente de frutos maduros cedidos pela Epagri e inoculados em meio MS sem reguladores para germinação in vitro. Posteriormente, segmentos nodais contendo de 1 a 2 nós foram retirados das plântulas e introduzidos ao meio MS para primeiro e segundo subcultivo suplementado com TDZ (0; 0,5; 1,0 e 2,0 μM). Após 30 dias foram avaliados e subcultivados, no mesmo meio com as mesmas concentrações do fitorregulador. No segundo experimento três formulações salinas (MS, WPM, LPm) e quatro concentrações de TDZ (0; 0,5; 1,0 e 2,0 μM) foram avaliados após 30 dias. O uso de TDZ em diferentes concentrações foi indiferente a formação de brotos, e ainda, o número de nós por broto regenerado diminui com o aumento da concentração de TDZ. Em subcultivo sucessivo, a taxa de resposta morfogênica, o número de brotos regenerados, o número de nós por broto e a altura dos brotos diminuem. Em meio de cultura LPm os microbrotos regenerados tiveram efeito inibitório na altura dos brotos com o aumento da concentração de TDZ. O uso de 2,0 M de TDZ em meio de cultura LPm promoveu menor número de brotos regenerados, menor número de nós por broto e menor altura dos brotos do que em meio MS e WPM. O protocolo recomendado para a multiplicação por organogênese direta consiste no uso do meio de cultura semissólido MS, suplementado com 30 g L-1 de sacarose e 7,5 g L-1 de ágar-ágar, isento de regulador de crescimento.

The feijoa (Acca sellowiana (O. Berg.) Burret) is a native species of the Mata Atlântica and Pampa biomes, which have been suffering intense anthropic pressures that lead to loss of areas and biodiversity. Thus, methods have been sought for conservation and propagation of this species, and micropropagation is one of the viable alternatives. However, tissue culture needs improvement of the techniques available for routine use. The objective of this work was to evaluate the influence of different Thidiazuron (TDZ) concentrations and different culture media on the morphogenic responses of feijoa. The analyzes consisted of two experiments, the first evaluating the effect of different TDZ concentrations and the second evaluating the effect of three culture media on different TDZ concentrations. The seeds used were manually removed from ripe fruits provided by Epagri and inoculated in MS media without regulators for in vitro germination. Subsequently, nodal segments containing 1 to 2 knots were removed from the seedlings and introduced to the MS media for first and second subcultures supplemented with TDZ (0; 0.5; 1.0 and 2.0 μM). After 30 days they were evaluated and subcultured in the same media with the same phytoregulator concentrations. In the second experiment three saline formulations (MS, WPM, LPm) and four TDZ concentrations (0, 0.5, 1.0 and 2.0 μM) were evaluated after 30 days. The use of TDZ at different concentrations promotes bud formation, and the number of nodes per regenerated shoot decreases with increasing TDZ concentration. In successive subculture, the morphogenic response rate, the number of shoots regenerated, the number of nodes per shoot and the height of the shoots decrease. In LPm culture media regenerated microshoots had an inhibitory effect on shoot height with increasing TDZ concentration. The use of 2.0 μM of TDZ in LPm culture media promoted smaller number of regenerated shoots, smaller number of nodes per shoot and smaller shoot height than in MS and WPM media. The recommended protocol for direct organogenesis multiplication is the use of MS solid media supplemented with 30 g L -1 sucrose and 7,5 g L -1 ágar-ágar free promotes.