| dc.description.abstract |
O nucleosídeo de guanina (GUO) é um nucleosídeo endógeno que vem sendo
mostrado como agente neuroprotetor em modelos de isquemia cerebral. A GUO
previne redução da viabilidade celular, da captação de glutamato e reduz efeitos
deletérios causados pela isquemia cerebral tanto em modelos in vitro quanto in
vivo. Embora diversos efeitos da GUO já tenham sido descritos, os mecanismos
celulares responsáveis por esses efeitos ainda não foram elucidados. Acredita-se
que o sistema de transmissão purinérgica, que regula vasodilatação, sistema
imune, liberação de transmissores e diversos outros processos celulares,
medeiam os efeitos neuroprotetores da GUO. Este trabalho buscou avaliar a
relação entre diferentes subtipos de receptores do sistema adenosinérgico e o
efeito neuroprotetor da GUO in vitro, além disso, analisamos a possibilidade de
uma interação direta entre a GUO e os receptores de adenosina (AdoR) in silico.
Fatias de hipocampo de 400 μm de ratos Wistar machos (60-90 dias) foram
submetidas a 15 minutos de privação de glicose e oxigênio (PGO), seguida de
180 minutos de reoxigenação (PGO/R). Guanosina (100 μM) e/ou DPCPX
(antagonista do receptor A1, 100 nM) e CGS21680 (agonista do receptor A2a, 50
nM) foram adicionados durante o período de reoxigenação. A viabilidade celular
foi determinada pela capacidade das células de reduzir brometo de 3-(4,5-
dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio (MTT). O lactato extracelular (meio de
incubação) foi mensurado via kit enzimático (Labtest® - Brasil). Por fim, a
interação GUO-AdoR foi avaliava por análises de atracamento molecular. Fatias
de hipocampo submetidas à PGO/R sofreram um decréscimo significativo na
viabilidade celular e nos níveis de lactato extracelular. O tratamento com
guanosina preveniu a perda a viabilidade celular e aumentou parcialmente os
níveis de lactato extracelular. O agonista do receptor A1, DPCPX, suprimiu o
efeito neuroprotetor da GUO, já CGS21680, um agonista do receptor A2a,
apresentou efeitos semelhantes à GUO em relação a esses parâmetros. As
análises de atracamento molecular mostraram resíduos de interação consistentes
com os resíduos do sítio ativo, porém valores de energia livre maiores em relação
ao seu ligante endógeno. Esses achados trazem novos dados sobre a
importância do sistema adenosinérgico nos efeitos neuroprotetores da GUO e
sugerem que uma sinalização mediada pela GUO pode ocorrer não na forma
monomérica, mas na forma heterodimérica dos receptores A1-A2a. |
pt_BR |
