Rastreamento em cascata da hipercolesterolemia familiar: otimização de um método de genotipagem e estratificação de risco dos pacientes

Abstract

A hipercolesterolemia familiar (HF) é uma doença genética com defeitos nos genes LDLR, APOB ou PCSK9 e seus portadores apresentam concentrações de colesterol total (CT) e LDL-c acentuadamente elevadas. O grau de suspeição dos portadores é baixo e a mortalidade precoce é elevada quando não tratada. A forma mais eficiente de triagem é o rastreamento dos parentes de pacientes já diagnosticados (caso-índice) e, apesar de o diagnóstico genético ser padrão de referência, há falta de métodos acessíveis na rotina clínica. Assim, este estudo teve como objetivo diagnosticar pacientes com HF no Brasil a partir da otimização de um método para a identificação de mutações no LDLR. A identificação dos casos índices foi feita de acordo com a I Diretriz Brasileira de Hipercolesterolemia Familiar. A partir das mutações encontradas, foi feita a triagem nos parentes dos casos índices. Além disto, foi realizada a avaliação dos marcadores de risco para doenças cardiovasculares. O método permitiu a obtenção de sequências com qualidade adequada para a identificação de mutações. Inicialmente, 210 indivíduos participaram do estudo, porém, 87 foram excluídos e, assim, 123 indivíduos (5 a 89 anos) participaram do rastreamento, sendo 35 provenientes de Papanduva-SC e 88 de Bom Despacho-MG. O diagnóstico de HF foi confirmado em 53 indivíduos e 14 mutações foram encontras (oito patogênicas: 632A>T; 661G>A; 666C>A; 670G>A; 682G>A; 862G>A; 901G>A; 919G>A e seis polimorfismos não associados à HF: 928A>T; 1413A>G; 1773C>T; 1959T>C; 2177C>T; 2232A>G). Apenas a mutação 682G>A já fora descrita no Brasil, enquanto as mutações 901G>A e 928A>T foram descritas pela primeira vez no mundo. Dentre os 53 indivíduos com HF e que estão em alto risco cardiovascular, 42 foram reclassificados como em muito alto risco . Os indivíduos com HF apresentaram CT, LDL-c e não-HDL-c maiores que aqueles sem HF (p < 0,0001). Tratamentos hipolipemiantes eram realizados em 50% dos portadores e em 5,7% dos indivíduos sem HF (p = 0,0001). O rastreamento genético em cascata se mostrou efetivo para ampliar o número de diagnósticos e permitiu iniciar tratamento e acompanhamento adequados aos pacientes. Ainda há necessidade de triar geneticamente outras famílias brasileiras visando à ampliação dos diagnósticos. Assim, o presente estudo ajudou a obter mais informações sobre as bases moleculares da HF no Brasil e a expandir o espectro de mutações no LDLR.

Abstract : Familial hypercholesterolemia (FH) is a genetic disease with defects in the LDLR, APOB or PCSK9 gene, and the carriers have total cholesterol (TC) and LDL-c levels markedly increased. The suspicion of these carriers is low and early mortality is high when untreated. The most efficient way of screening is tracing the relatives of patient already diagnosed (index case). Genetic diagnosis is the reference standard, however, there is a lack of accessible methods in the clinical routine. Thus, this study aimed to diagnose patients with FH in Brazil using an optimized method for the identification of the LDLR mutations. The identification of index cases was performed according to the I Brazilian Guideline for Familial Hypercholesterolemia. Based on the mutations found, the relatives of the index cases were screened. Furthermore, we performed the assessment of risk markers for cardiovascular diseases. The method developed showed favorable sensitivity and specificity for the identification of mutations. Initially, 210 subjects participated in the study; however, 87 were excluded, thus, 123 subjects (5 to 89 years old) participated in the screening, 35 from Papanduva-SC and 88 from Bom Despacho-MG. The diagnosis of FH was confirmed in 53 individuals and 14 mutations were found (eight pathogenic: 632A>T; 661G>A; 666C>A; 670G>A; 682G>A; 862G>A; 919G>A and six polymorphisms: 928A>T; 1413A>G; 1773C>T; 1959T>C; 2177C>T; 2232A>G). Only the mutation 682G>A had been described previously in Brazil and the mutations 901G>A and 928A>T were first described worldwide. Of the 53 individuals with FH and classified as \"high risk\" cardiovascular, 42 were reclassified as \"very high risk\". Individuals with FH had higher TC, LDL-c, and non-HDL-c levels than those without the diagnosis of FH (p <0.0001). Lipid-lowering treatment was performed by 50% of subjects with FH and 5.7% of subjects without FH (p = 0.0001). The genetic cascade screening was effective in increasing the number of diagnosed cases. Based on the definitive diagnosis of FH, it was possible to provide adequate lipid-lowering treatment and follow-up. There is a need to genetically screen other Brazilian families in order to continue the expansion of the diagnoses. Therefore, the present study helped to obtain more information on the molecular bases of FH in Brazil and to expand the spectrum of mutations in LDLR.