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Abstract:
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A pigmentação é uma característica presente em todos os animais e possui muitas funções. Apesar de existirem vários tipos de células pigmentares (cromatóforos), os melanócitos são compartilhados por todos os cordados, e tem sua origem da crista neural (CN). As células da CN se formam durante fechamento do tubo neural, nas bordas do neuroepitélio. Após sofrerem transição epitélio-mesenquimal, elas migram por rotas específicas, diferenciando em seus tecidos alvo. Os melanócitos surgem, principalmente, das células da CN que seguem a rota de migração dorso-lateral. Quando essas células estão migrando param de expressar FoxD3, mas mantém sua expressão de Sox10, para mais tarde começar a expressar Mitf. O EGF é uma pequena proteína que é expressa pelo embrião em desenvolvimento e que atua como um fator solúvel. Dados anteriores do nosso grupo demonstraram que o tratamento com Egf em culturas de células da CN promove a diferenciação dessas células para melanócitos e neurônios. Para compreender melhor os mecanismos celulares associados a esse efeito, foram avaliados nesse trabalho a influência de Egf sobre a expressão de FoxD3 e Sox10, considerados os principais reguladores da diferenciação para melanócitos. Segmentos truncais inteiros de embrião de codorna foram cultivados em condição controle, suplementado com Egf (10 ng/ml), suplementado com Cetuximab (50 μg/ml) um bloqueador do EgfR e suplementado com Egf e Cetuximab (10 ng/ml e 50μg/ml, respectivamente). Após esse período foi realizada hibridização in situ para FoxD3 e Sox10 e analisados os padrões de expressão mediante os tratamentos. Além disso, foram realizados experimentos com células de melanoma murino (B16/F10), afim de avaliar o efeito do Egf sobre a expressão de Mitf. Os resultados obtidos mostraram que o Egf reduz a expressão de FoxD3 nas células da crista neural migratórias, e que o bloqueio do EgfR diminui drasticamente a expressão de Sox10. As células de melanoma murino não apresentaram diferenças entre seus tratamentos. Esses dados sugerem que o Egf atua no controle molecular do processo de diferenciação dos melanócitos. Além disso, nossos resultados demonstram que células de melanoma utilizam mecanismos moleculares diferentes daqueles do desenvolvimento embrionário. |
