Investigação bioquímica do sistema antioxidante de Crassostrea gigas expostas a 1-cloro-2,4-dinitrobenzeno: o papel da glutationa na resposta a agentes eletrofílicos

Abstract

O sistema antioxidante é um importante mecanismo de defesa, o qual visa à manutenção da homeostase celular. Este trabalho teve como objetivo melhor caracterizar a modulação de parâmetros relacionados ao sistema antioxidante e de biotransformação de xenobiótiocs de fase II. Brânquias e glândula digestiva foram estudadas em ostras do pacífico Crassostea gigas, expostas via água do mar por até 24 hrs ao composto eletrofílico sintético 1-cloro-2,4- dinitrobenzeno (CDNB), conhecido por sua capacidade de promover distúrbios no sistema antioxidante. Um experimento adicional foi realizado utilizando N-etilmaleimida (NEM) visando comparar o padrão de alteração dos níveis de GSH na brânquia com a glândula digestiva causados por estes compostos. O efeito do CDNB foi evidenciado apenas nas brânquias: (i) foi verificada uma rápida e intensa diminuição dos níveis de GSH após 4 h (~60%), 10 h (~79%) e 24 h (~87%). (ii) Além disso, foi observado, neste mesmo tecido, uma diminuição progressiva da atividade das enzimas antioxidantes GR e TrxR, com uma inibição de 50-60% após 24 h; e (iii) um rápido aumento (75%) na atividade da enzima de biotransformação glutationa S-transferase (GST) ao final do tratamento. A enzima, γ-glutamil transpeptidase, e os níveis de peroxidação lipídica (TBARS) não apresentaram alterações. É evidente o efeito deletério do CDNB sobre as defesas antioxidantes destes animais, o qual também pode ser evidenciado pela indução de mortalidade (33%) após uma exposição contínua por 96 h. Já no caso da NEM, nas brânquias foi observada uma diminuição de cerca de 70% nos níveis de GSH, chegando a 80% na maior concentração utilizada. Um segundo delineamento experimental foi utilizado para investigar se o consumo de GSH na glândula digestiva poderia ocorrer na ausência da brânquia como uma primeira barreira de absorção destes compostos. Para isto, NEM foi injetada no músculo adutor e os níveis de GSH foram analisados. Na brânquia houve uma diminuição de ~ 52%, chegando em ~ 98% na maior concentração utilizada, além disso, foi verificada também a diminuição nos níveis de GSH-t na glândula digestiva nos grupos de maior concentração, aproximadamente 33% e 90%. Em conjunto, os dados indicam para um evidente papel da brânquia na proteção destes animais contra agentes eletrofílicos e que este tecido impõe uma barreira inicial de metabolização através de um sistema dependente de GSH. Esta barreira aparentemente protege outros órgãos contra o ataque de substâncias eletrofílicas com potencial pró-oxidante e tóxico.