Análise epidemiológica e de associação de polimorfismos do Complexo Principal de Histocompatibilidade com o câncer de mama em mulheres de Santa Catarina

Abstract

O câncer de mama é uma doença multifatorial que resulta de interações complexas entre fatores genéticos, imunológicos, ambientais, comportamentais, hormonais e reprodutivos. Alguns fatores de risco já são bem estabelecidos, como, idade avançada, gênero feminino, menarca antes dos 12 anos de idade, menopausa tardia, uso de anticoncepcionais, terapia de reposição hormonal, nuliparidade, histórico familial e herança genética. Sabe-se que as células tumorais alteram o microambiente para facilitar o escape do sistema de imunovigilância, sendo que, dentre as alterações está à alta expressão de HLA-G. O HLA-G possui na sua 3’UTR um sítio polimórfico de inserção ou delação de um fragmento de 14pb, relacionado com a estabilidade e expressão do gene. Assim, objetivou-se genotipar um polimorfismo de inserção Alu, AluyHG, numa região intergênica próxima do HLA-G, em 232 pacientes e 232 controles (pareados por gênero e idade) e verificar a influência deste polimorfismo na patogênese da doença juntamente com o polimorfismo HLA-G14pb*In/Del. O DNA foi extraído de sangue total e a genotipagem feita por PCR e visualizada em gel de agarose. Foram realizados cálculos das frequências alélicas e genotípicas, análises de associações, de haplótipos e de combinações haplotípicas. Após as análises foram encontradas associações do polimorfismo AluyHG e o risco de desenvolver câncer de mama para o genótipo *Presença/Presença OR=0,007 (p=0,000; IC95%=0,003-0,014). Para os fatores de risco obteve-se associação de risco com histórico familial OR=2,283 (p=0,000; IC95%= 1,487-3,511), hábito tabagista OR=2,399 (p=0,000; IC95%= 1,503-3,839), utilização de contraceptivo oral por mais de 5 anos OR=1,681 (p=0,011; IC95%= 1,124-2,514), amamentar por menos de 6 meses OR=1,538 (p=0,037; IC95%=1,025-2,311). Obteve-se uma associação de proteção para nuliparidade OR=0,025 (p=0,000; IC95%=0,014-0,045). Analisando os haplótipos formados pelos polimorfismos HLA-G14pb*In/Del e AluyHG não se encontrou nenhuma associação significativa. Levando em consideração as combinações haplotípicas encontrou-se associação para *Del-Presença/*Del-Presença (OR= 2,079; IC95%= 1,111-3,911; p= 0,020) e *In-Ausência/*Del-Presença (OR= 0,454; IC95%= 0,256-0,803; p= 0,006). Conclui-se que estes polimorfismos precisam se mais amplamente estudados quanto às suas relações com o câncer de mama e os fatores de risco envolvidos, assim como, as relações entre os polimorfismos na busca de um bom marcador genético.

Breast cancer is considered a multifactorial disease that results from complex interactions between genetic, immunological, environmental, behavioral, hormonal and reproductive factors. Some risk factors are already well established, such as being woman, advanced age, menarche before 12 years of age, late menopause, contraceptive use, hormone replacement therapy, nulliparity, family history and genetic inheritance. It is known that tumor cells alters the microenvironment to facilitate the escape from immunosurveillance, whereas, included among the alterations, are the high expression of HLA-G. The 14-bp insertion/deletion (indel) polymorphism located in the 3' UTR of the HLA-G gene plays a role in stability and gene expression. For this study, we aimed to infer the Alu genotype (insertion AluyHG polimorphism), present in an intergenic region near the HLA-G, in a cohort of 232 patients and 232 controls (matched for gender and age), and determining the influence of this polymorphism in the pathogenesis of the disease along with the polymorphism *14pbIn/del. The DNA samples were extracted from whole blood, and the genotyping was carried out by PCR, whereas visualization was made by 1% agarose gel. Calculations of allele and genotype frequencies were performed, as well as association analysis, haplotype inference and haplotype combinations. After the analysis, associations were found with the AluyHG polymorphism and the risk of developing breast cancer for genotype Presence/ Presence, OR = 0.007 (p = 0.000, 95% CI 0.003 to 0.014). Furthermore, for risk factors, were obtained association with family history OR = 2.283 (p = 0.000, 95% CI 1.487 to 3.511); smoking habit, OR = 2.399 (p = 0.000, 95% CI 1.503 to 3.839); use of oral contraceptives for more than 5 years, OR = 1.681 (p = 0.011, 95% CI 1.124 to 2.514), and breastfeed for less than 6 months, OR = 1.538 (p = 0.037, 95% CI 1.025 to 2.311). The association for nulliparity was protective against the risk factor, OR = 0.025 (p = 0.000, 95% CI 0.014 to 0.045). When analyzing the haplotypes formed by indel polymorphism 14pb and the Alu insertion AluyHG, no significant association was found. Considering the haplotype combinations, associations were found for *Del-Presence/ *Del-Presence (OR = 2.079, 95% CI 1.111 to 3.911, p = 0.020) and *In-Absence/ *Del-Presence (OR = 0.454 95% CI = 0.256-0.803, p = 0.006).The findings indicate that these polymorphisms need to be more widely studied, particularly regarding their relationship with breast cancer and the risk factors involved, as well as the relationship between polymorphisms in the search for new and better genetic markers