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Abstract:
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Durante o desenvolvimento do zigoto em um organismo adulto gradualmente são formadas, a partir de células-tronco, células especializadas. Estas, no entanto, podem sofrer reprogramação celular, quando têm alteradas suas características específicas, podendo haver uma perda destas (desdiferenciação) e nova diferenciação (ou manter o estado desdiferenciado). Além disto, pode ocorrer uma passagem direta do fenótipo original a outro (transdiferenciação), o que ocorre geralmente entre tipos celulares com a mesma origem embrionária. Neste trabalho, utilizamos células musculares lisas de aorta de embriões de codorna com dez dias de incubação, para avaliar, sob condições distintas de cultivo celular (tempo e meio de cultura), uma possível reprogramação. Tendo em vista que as células estudadas provêm da crista neural (CN), focamos nossa atenção para uma reprogramação a alguns derivados desta. Utilizamos marcadores imunocitoquímicos característicos dos seguintes derivados de CN: célula muscular lisa (foi utilizado anti-SMA), célula glial de Schwann (anti-SMP), célula indiferenciada da CN (anti-HNK-1) e célula neuronal (anti-B-TUBIII). Cultivamos as células em quatro meios distintos, com um deles servindo de base para os outros três, por sua vez suplementados com fatores definidos. Observamos expressão de todos os marcadores testados em todos os meios de cultura, dentre aqueles com fatores definidos, no entanto, a presença de insulina em um dos meios foi um aspecto diferencial para a expressão de SMP. Fixamos as culturas celulares nos dias 1, 3 e 5 após o início desta, foi observada a expressão dos marcadores anti-SMA, anti-SMP e anti-HNK-1 nos dias 1, 3 e 5, enquanto a proteína B-TUBIII foi expressa apenas nos dias 3 e 5. Diminuição na marcação de anti-SMA ao longo dos dias e marcação para anti-HNK-1 sugerem que houve reprogramação celular por desdiferenciação, além disto, dupla marcação de células anti-SMP positivas com anti-SMA positivas indica que houve reprogramação por transdiferenciação nas células em cultura. Por fim, destacamos a derivação obtida, a partir das células musculares lisas, de células positivas para anti-B-TUBIII, o que até o momento não foi descrito a partir de nenhum outro derivado da CN. |
