Canabinoides em óleos medicinais e extratos de Cannabis sativa L.: utilização de cromatografia líquida de ultra eficiência aplicada a estudos de estabilidade e teor de CBD e Δ9-THC

Abstract

A Cannabis sativa L. tem assumido relevância crescente no cenário terapêutico em virtude do potencial farmacológico de seus fitocanabinoides, especialmente o canabidiol (CBD) e o ??-tetraidrocanabinol (??-THC). No Brasil, o marco regulatório relacionado à Cannabis tem evoluído significativamente nos últimos anos com a publicação de diferentes resoluções da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (Anvisa), incluindo a RDC nº 1.012/2026, que estabelece normas para o cultivo destinado à pesquisa científica; a RDC nº 1.013/2026, que regulamenta o cultivo e a produção de Cannabis para fins exclusivamente medicinais e farmacêuticos por pessoas jurídicas; a RDC nº 1.014/2026, que dispõe sobre o funcionamento de associações de pacientes sem fins lucrativos; e a RDC nº 1.015/2026, que atualiza o marco regulatório para fabricação e importação de produtos de Cannabis para uso medicinal no Brasil. Paralelamente a esse avanço regulatório, torna-se essencial assegurar a qualidade e a estabilidade físico-química de produtos à base de Cannabis. O presente estudo teve como objetivo desenvolver e validar um método analítico por cromatografia líquida de ultra eficiência com detector de arranjo de diodos (UPLC-PDA) para a quantificação simultânea de cinco canabinoides conforme a RDC nº 166/2017, e aplicá-lo em estudo de estabilidade acelerada de extratos etanólicos e formulações oleosas. O método apresentou linearidade sisfatória (R2 > 0,999), precisão, exatidão, seletividade e robustez adequadas, demonstrando confiabilidade para o monitoramento da estabilidade. Os resultados evidenciaram degradação do ?9-THC, especialmente em extrato etanólico sob condição de 40°C, com formação concomitante de CBN, enquanto o CBD apresentou maior estabilidade relativa. A modelagem cinética indicou comportamento predominantemente de primeira ordem, permitindo a estimativa do t90. Para o ??-THC, estimou-se um t90 de aproximadamente 351 dias em extrato sob refrigeração (~6°C), 33 dias em temperatura ambiente (~20°C) e 3 dias a 40°C, enquanto em óleo os valores foram de 176, 117 e 19 dias, respectivamente. Para o CBD, estimaram-se 176, 151 e 132 dias em extrato sob as mesmas condições e 351, 351 e 11 dias em óleo respectivamente. Além da aplicação no estudo de estabilidade acelerada, o método desenvolvido foi aplicado na análise de aproximadamente 250 amostras reais de produtos à base de Cannabis, incluindo extratos etanólicos e formulações oleosas provenientes de associações de pacientes e produtores autorizados, demonstrando aplicabilidade prática, robustez e potencial para utilização em rotinas de controle de qualidade. Os resultados reforçam a influência determinante da matriz e da temperatura na estabilidade dos canabinoides e destacam a importância de métodos analíticos validados e da modelagem cinética para fundamentar a definição de prazos de validade e condições adequadas de armazenamento de produtos à base de Cannabis medicinal.

Abstract: Cannabis sativa L. has gained increasing relevance in the therapeutic field due to the pharmacological potential of its phytocannabinoids, especially cannabidiol (CBD) and ??-tetrahydrocannabinol (?9-THC). In Brazil, the regulatory framework related to Cannabis has evolved significantly in recent years with the publication of different resolutions by the Brazilian Health Regulatory Agency (Anvisa), including RDC No. 1,012/2026, which establishes standards for cultivation intended for scientific research; RDC No. 1,013/2026, which regulates the cultivation and production of Cannabis exclusively for medicinal and pharmaceutical purposes by legal entities; RDC No. 1,014/2026, which provides regulations for the operation of non-profit patient associations; and RDC No. 1,015/2026, which updates the regulatory framework for the manufacture and importation of Cannabis-based medicinal products in Brazil. Alongside these regulatory advances, ensuring the physicochemical quality and stability of Cannabis-based products has become essential. This study aimed to develop and validate an analytical method using ultra-performance liquid chromatography coupled with a photodiode array detector (UPLC-PDA) for the simultaneous quantification of five cannabinoids according to RDC No. 166/2017, and to apply it to accelerated stability studies of ethanolic extracts and oil-based formulations. The method showed satisfactory linearity (R² > 0.999), precision, accuracy, selectivity, and robustness, demonstrating reliability for stability monitoring. The results showed degradation of ?9-THC, especially in ethanolic extracts under the 40°C condition, with concomitant formation of CBN, whereas CBD exhibited greater relative stability. Kinetic modeling indicated predominantly first-order behavior, allowing the estimation of t90. For ?9-THC, the estimated shelf life was approximately 351 days in refrigerated extract (~6°C), 33 days at room temperature (~20°C), and 3 days at 40°C, while in oil the values were 176, 117, and 19 days, respectively. For CBD, the estimated t90 values were 176, 151, and 132 days in extract under the same conditions, and 351, 351, and 11 days in oil, respectively. In addition to its application in accelerated stability studies, the developed method was applied to the analysis of approximately 250 real-world Cannabis-based product samples, including ethanolic extracts and oil formulations from patient associations and authorized producers, demonstrating practical applicability, robustness, and potential for use in routine quality control analyses. The results reinforce the determining influence of matrix composition and temperature on cannabinoid stability and highlight the importance of validated analytical methods and kinetic modeling to support the establishment of shelf-life periods and appropriate storage conditions for medicinal Cannabis-based products.