Avaliação in vitro do efeito rejuvenescedor do meio condicionado (secretoma) de células estromais mesenquimais humanas

Abstract

Células estromais mesenquimais (MSCs) são células-tronco adultas multipotentes que apresentam grande potencial clínico. Estudos recentes indicam que os benefícios das MSCs estão associados principalmente às suas propriedades secretoras, conhecidas como secretoma. O secretoma é um conjunto de biomoléculas, exossomos e vesículas extracelulares (EVs), obtido a partir do sobrenadante de culturas de MSCs, o meio condicionado (MC). Essas moléculas reduzem a resposta inflamatória, contribuindo para a regeneração tecidual. A senescência celular corresponde a um estado não proliferativo e metabolicamente ativo irreversível, em que a célula passa a secretar moléculas pró-inflamatórias. Esse acúmulo de células senescentes compromete a homeostase e a regeneração da pele, contribuindo para o envelhecimento tecidual. Nesse contexto, o uso do secretoma de MSCs surge como uma alternativa promissora para restaurar funções celulares e atenuar os efeitos do envelhecimento. Dessa forma, o projeto propõe avaliar o potencial do secretoma de MSCs em reverter ou atenuar a senescência de queratinócitos humanos de linhagem HaCaT induzida por peróxido de hidrogênio (H₂O₂) ou radiação ultravioleta (UV). Para isso, as MSCs foram isoladas e cultivadas a partir de amostras de pele provenientes de cirurgia de abdominoplastia. Posteriormente, o MC foi produzido e aplicado em células HaCaT previamente induzidas à senescência com H₂O₂ e UVB. Após a aplicação, a eficiência do tratamento foi avaliada por meio da análise de viabilidade celular, análise morfológica, número populacional de células e análise da redução de senescência por meio do ensaio de B-galactosidase ácida (as-β-gal). Os resultados mostram aumento na viabilidade celular e aumento no número total de células, em 65% em células induzidas por H₂O₂ e 45% em células induzidas por UVB. Também foi encontrada diferença entre as morfologias celulares de HaCaT induzida e HaCaT induzida e tratada com MC. Ainda, o ensaio de as-β-gal apresentou uma redução na proporção de células senescentes em 10% para H₂O₂ e 20% para UVB. Os resultados indicam que o tratamento com MC reduziu efeitos associados à senescência celular, o que corrobora seu potencial terapêutico como estratégia promissora para a medicina regenerativa.