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Abstract:
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Feijoa sellowiana (O. Berg) O. Berg é uma espécie arbórea frutífera de reconhecida importância agronômica com alto potencial comercial, gastronômico, nutracêutico e farmacológico. Contudo, a produção em escala comercial de seus cultivares registrados ainda é limitada devido à alta recalcitrância da espécie à propagação vegetativa. Nesse sentido, o presente estudo objetivou avançar na definição de protocolo para o estabelecimento in vitro de segmentos nodais visando a micropropagação, comparando métodos de desinfestação superficial. Para tanto, foram realizados dois experimentos. No experimento 1, foram coletados brotos jovens e não lignificados de plantas matrizes mantidas em casa de vegetação. Imediatamente após a coleta, os brotos foram imersos em soluções aquosas de: i) Fungicida a base de oxicloreto de cobre (3 g L-1) (F); ii) Fungicida (3 g L-1) + Polivinilpirrolidona (PVP) (2 g L-1) (FPVP); iii) Hipoclorito de sódio (1%) (H); iv) Hipoclorito de sódio (1%) + PVP (2 g L-1) (HPVP) e; v) Controle (água destilada) (C). Nessas soluções, os brotos foram mantidos por 1, 2, 3, 4, 8 e 24 horas, caracterizando um experimento fatorial (5 × 6) com 30 tratamentos e 5 repetições. No experimento 2, metade das matrizes foram tratadas com fungicida 3 vezes por semana durante um mês. Após, foram coletados brotos jovens e não lignificados, que foram imediatamente imersos em solução aquosa de hipoclorito sódio (1%) e polivinilpirrolidona (2 g L-1) por 0, 2, 4 e 6 horas, caracterizando um experimento fatorial 2 × 4 (aplicação de fungicida e tempos de imersão) com 10 repetições. Após, para os dois experimentos, em câmara de fluxo laminar, os brotos foram retirados das soluções, imersos em álcool 70% por 60 seg., lavados por três vezes em água destilada e autoclavada e, por fim, seccionados em segmentos nodais. Os explantes foram inoculados em tubos de ensaio contendo 5 ml meio de cultura simples (30 g L-1 de sacarose e 6 g L-1 de agar) e mantidos em sala de crescimento com temperatura de 25 °C e fotoperíodo de 16 horas de luz. Os explantes foram avaliados quanto a sobrevivência, a oxidação, a contaminação fúngica, contaminação bacteriana, formação de calo e formação de brotos. A análise estatística procedeu-se por meio de regressões logísticas com ajuste de Firth, comparando-se par a par as médias marginais estimadas. No experimento 1, houve interação entre os tipos de solução de desinfestação e o tempo de imersão para todas as variáveis avaliadas. Observou-se altas taxas de sobrevivência para o tratamento HPVP. Em explantes que foram submersos em solução H observou-se um aumento na probabilidade de oxidação conforme o aumento do tempo de imersão. Para as soluções H e HPVP, tempos de imersão maiores que oito horas não apresentaram contaminação por fungos. Conclui-se que, a imersão em HPVP por, no mínimo, seis horas é o método mais adequado para introdução in vitro da Feijoa sellowiana. Para o experimento 2, a sobrevivência variou de 70% a 100%. Das 80 parcelas do experimento, apenas duas apresentaram oxidação. A contaminação fúngica variou de 0% a 70%, apresentando interação significativa entre os tratamentos. Não houve diferença significativa entre os tempos de imersão 2, 4 e 6 horas, enquanto 0 horas o fungicida reduziu a CF. Explantes oriundos de plantas não tratadas com fungicida e submetidos a 4 horas de solução de desinfestação apresentam maior sobrevivência e menor contaminação, favorecendo o estabelecimento in vitro. |
