Participação da disfunção mitocondrial na indução de neuroinflamação em células microgliais expostas ao excesso de cobre.
Author:
Santos, Rafael Heitor Nascimento dos
Abstract:
O cobre é um elemento essencial para a atividade metabólica e celular no sistema nervoso central (SNC), mas o seu acúmulo excessivo desencadeia estresse oxidativo e toxicidade mitocondrial. As células microgliais podem captar cobre e são particularmente sensíveis a alterações redox, podendo desencadear respostas neuroinflamatórias sob estímulos nocivos. Neste sentido, o presente estudo teve como objetivo analisar parâmetros relacionados à disfunção mitocondrial e à neuroinflamação em células de linhagem microglial murina (BV-2) expostas a diferentes concentrações de sulfato de cobre (CuSO4; 0 a 600 µM) por períodos de 24 e 48 horas. Para tanto, avaliou-se a atividade dos Complexos I, II e IV da cadeia respiratória por métodos espectrofotométricos, o potencial de membrana mitocondrial (∆Ψm) utilizando a sonda fluorescente JC-1, a produção de ânion superóxido mitocondrial através da sonda MitoSOX Red e o imunoconteúdo do fator nuclear kappa B (NF-κB) por imunofluorescência. Os resultados demonstraram que a exposição ao CuSO4 provocou uma redução significativa na atividade do Complexo II (succinato desidrogenase) a partir da concentração de 400 µM após 48 horas, sem alterar a atividade dos Complexos I e IV ou despolarizar o ∆Ψm nos tempos e concentrações analisados. Em contrapartida, observou-se uma elevação expressiva na geração de superóxido mitocondrial em todas as concentrações testadas após 24 e 48 horas. Esse aumento do estresse oxidativo mitocondrial foi acompanhado por uma elevação significativa no imunoconteúdo de NF-κB na concentração de 400 µM em ambos os períodos de exposição. Conclui-se que o excesso de cobre induz estresse oxidativo mitocondrial e compromete o Complexo II da cadeia respiratória, além de ativar a via de sinalização NF-κB, favorecendo a transição da micróglia para um fenótipo pró-inflamatório, o que sugere a participação da disfunção mitocondrial na indução da neuroinflamação no SNC.
