O envolvimento dos receptores canabinoides do tipo CB2 na modulação de memórias aversivas em ratos Wistar

Abstract

A memória é um processo neurofisiológico dinâmico que recupera informações aprendidas por meio de mecanismos associativos e envolve diferentes processos de formação, armazenamento e manutenção. Embora os receptores canabinoides do tipo CB2 estejam envolvidos na consolidação da memória aversiva instrumental, seu papel nas diferentes etapas da memória aversiva associativa ainda é pouco compreendido. O principal objetivo da pesquisa foi investigar se a manipulação farmacológica dos receptores CB2, por meio do agonista beta-cariofileno (BCP) e do antagonista AM630, pode alterar a consolidação, evocação, reconsolidação e extinção de memórias aversivas pavlovianas. Para isso, quatro experimentos com ratos Wistar machos, utilizando o protocolo de condicionamento aversivo ao contexto e administração intraperitoneal de BCP (10 ou 50 mg/kg), AM630 (0,5 ou 2 mg/kg) ou veículo em diferentes situações a fim de investigar o envolvimento dos receptores CB2 no processamento da memória aversiva foram realizados. O tempo de congelamento (ausência de movimentos do animal, medida pelo software ANY maze) é considerado como um comportamento defensivo indicativo do aprendizado e memória associativa de natureza emocional aversiva. No Experimento 1, as drogas foram administradas após o treino para modular a consolidação da memória aversiva. No Experimento 2, a administração ocorreu 30 minutos antes do teste, visando modular a evocação da memória. No Experimento 3, após a sessão de breve reativação da memória, as drogas foram injetadas para modular a reconsolidação, com teste no mesmo contexto e em um contexto similar após 48 h. O Experimento 4 avaliou a extinção da memória com administrações 30 minutos antes de cada uma das três sessões de reexposição, seguida de teste no mesmo contexto e no contexto B após 7 dias. Após verificar a normalidade dos dados pelo teste de Shapiro-Wilk, a análise estatística foi feita por teste t de Student ou ANOVA de uma ou duas vias, com post hoc de Tukey quando aplicável, ou testes não paramétricos (Kruskal-Wallis ou Mann-Whitney). O nível de significância foi de a = 0,05. Os resultados sugerem que não houve diferença estatística significativa no tempo de congelamento entre os grupos experimentais nos protocolos de consolidação, evocação e reconsolidação da memória aversiva. Todavia, no Experimento 4, a dose de 50 mg/kg de BCP demonstrou suprimir a expressão da generalização de medo, sugerindo uma melhor discriminação contextual no protocolo de extinção da memória aversiva. Tais achados contribuem para a compreensão do papel dos receptores CB2 na modulação da expressão de respostas defensivas e da flexibilidade comportamental, sugerindo o BCP como composto de interesse para a investigação de intervenções que modulam a generalização do medo. Diante da relevância desses achados, estudos futuros são necessários para elucidar os efeitos do BCP e para confirmar o envolvimento central dos receptores CB2 nesse processo.

Abstract: Memory is a dynamic neurophysiological process that retrieves learned information through associative mechanisms involving mechanisms for formation, storage, and maintenance. Previous studies have reported the involvement of CB2 receptors in the consolidation of instrumental aversive memory in rodents. However, their role across the different stages of associative aversive memory remains poorly understood. The main objective of this research was to investigate whether the pharmacological manipulation of CB2 receptors, using the agonist beta-caryophyllene (BCP) and the antagonist AM630, can alter the consolidation, recall, reconsolidation, and extinction of Pavlovian aversive memories. To this end, four experiments were conducted with male Wistar rats, using the protocol of contextual aversive conditioning and intraperitoneal administration of BCP (10 or 50 mg/kg), AM630 (0.5 or 2 mg/kg), or vehicle in different situations to investigate the involvement of CB2 receptors in the processing of aversive memory. The time spent freezing (absence of animal movement, measured by ANY-Maze software) is considered a defensive behavior indicative of learning and associative memory of an aversive emotional nature. In Experiment 1, drugs were administered after training to modulate the consolidation of aversive memory. In Experiment 2, administration occurred 30 minutes before the test, aiming to modulate memory recall. In Experiment 3, after a brief memory reactivation session, drugs were administered to modulate reconsolidation, with testing conducted in the same or a similar context 48 hours later. Experiment 4 evaluated memory extinction with administrations 30 minutes before each of the three re-exposure sessions, followed by testing in the same context and in context B after 7 days. After verifying data normality using the Shapiro?Wilk test, statistical analyses were performed using Student?s t-test or oneor two-way ANOVA, followed by Tukey?s post hoc test when appropriate, or non-parametric tests (Kruskal?Wallis or Mann?Whitney). The significance level was set at a = 0.05. The results showed no statistically significant differences in freezing time among experimental groups in the consolidation, retrieval, and reconsolidation protocols of aversive memory. However, in Experiment 4, the 50 mg/kg dose of BCP suppressed the expression of fear generalization, suggesting improved contextual discrimination in the aversive memory extinction protocol. These findings contribute to the understanding of the role of CB2 receptors in the modulation of defensive response expression and behavioral flexibility, suggesting BCP as a compound of interest for investigating interventions that modulate fear generalization. Given the relevance of these findings, further studies are required to elucidate the effects of BCP and to confirm the central involvement of CB2 receptors in this process.