Criopreservação do Meio Condicionado como Estratégia de Armazenamento do Secretoma de Células Estromais Mesenquimais Caninas

Abstract

As células estromais mesenquimais (CEM) são células-tronco multipotentes e têm sido amplamente estudadas para a aplicação terapêutica na medicina regenerativa humana e veterinária, já que possuem um potencial imunomodulatório, baixa imunogenicidade e exigem técnicas mais simples de extração e de cultivo in vitro. Mesmo assim, para aplicações terapêuticas, as CEM podem apresentar algumas limitações, como uma possível rejeição após o transplante. Para contornar esse problema, o secretoma, que é composto por diversas moléculas, fatores e vesículas secretadas pelas células no espaço extracelular, tem sido uma alternativa de estudo, onde se tem como objetivo o desenvolvimento de um produto de terapia celular avançada. Esse método apresenta menor imunogenicidade, o que contribui para facilitar as aplicações terapêuticas, além de garantir uma maior segurança, visto que, ao longo das passagens, as células cultivadas in vitro se tornam mais suscetíveis a alterações gênicas e à senescência celular. Porém, existem alguns desafios encontrados em pesquisas de metodologia associadas ao secretoma. Há uma urgência em desenvolver protocolos padronizados desde a coleta das células até a aplicação do secretoma. Entretanto, essa padronização é extremamente complexa por conta da característica do secretoma em ser dinâmico e responder às mudanças no microambiente, implicando que sua composição pode variar dependendo de diversos fatores, como a origem da fonte e condições de cultivo. Ademais, a obtenção do secretoma também torna-se difícil, considerando as práticas clínicas. Por isso, torna-se indispensável as pesquisas relacionadas ao armazenamento do meio condicionado. Dessa forma, este trabalho tem como objetivo comparar a eficácia do secretoma fresco e do secretoma criopreservado.