Caracterização de Enterobacterales produtoras de beta-lactamases isoladas de Procellariiformes encalhados no sul do Brasil.

Abstract

Os Procellariiformes são uma ordem de aves marinhas com comportamento pelágico, passando a maior parte de suas vidas nos oceanos. A crescente poluição dos oceanos tornou-se um desafio significativo para a sobrevivência dessas aves. Este estudo teve como objetivo avaliar a presença de Enterobacterales de alta prioridade em amostras clínicas de Procellariiformes resgatados e tratados na Associação R3 Animal, dentro do Centro de Pesquisa e Reabilitação de Animais Marinhos, em Florianópolis, Santa Catarina. As amostras da Associação R3 Animal foram coletadas como parte do Projeto de Monitoramento de Praias da Bacia de Santos (PMP/BS). Este projeto é uma exigência do Instituto Brasileiro do Meio Ambiente (IBAMA) para o licenciamento ambiental da produção e transporte de petróleo e gás natural pela Petrobras na província do pré-sal, conforme a ABIO Nº 640/2015. As cepas de Enterobacterales estudadas foram selecionadas da coleção da Associação R3 Animal, as quais foram isoladas em amostras clínicas de oito espécies de Procellariiformes , resultando em 26 isolados de interesse, provenientes de 11 animais, dentre os anos de 2015 a 2022.. O teste de sensibilidade aos antimicrobianos foi realizado utilizando o método de difusão em disco para identificar resistência a beta-lactâmicos, aminoglicosídeos, fluoroquinolonas e tetraciclina. Além disso, foi realizada triagem para produção de Beta-lactamases de Espectro Estendido (ESBLs) usando o método de aproximação de discos. Posteriormente, foi realizada PCR para identificação de genes de resistência nesses isolados. Entre os isolados de Enterobacterales de alta prioridade, identificamos dois isolados resistentes a carbapenêmicos e produtores de Metalo-beta-lactamase de Nova Délhi (NDM), apresentando o gene blaNDM, quatorze isolados produtores de ESBLs contendo o gene blaCTX-M1, gene blaTEM e o gene blaCTX-M9, e um isolado produtor de beta-lactamase AmpC, que apresentava o gene semelhante ao blaCMY-2. Este estudo demonstra a presença de bactérias de alta prioridade em aves marinhas, confirmando seu papel como sentinelas dos impactos antropogênicos. Isso ressalta a fragilidade da saúde dos ecossistemas marinhos, que podem estar contaminados com bactérias de origem poluente.

Procellariiformes are an order of seabirds with pelagic behavior, spending most of their lives in the oceans. The increasing pollution of the oceans has become a significant challenge for the survival of these birds. This study aimed to evaluate the presence of high-priority Enterobacterales in clinical samples from Procellariiformes rescued and treated at the R3 Animal Association, within the Marine Animal Research and Rehabilitation Center, in Florianópolis, Santa Catarina, Brazil. Samples from the R3 Animal Association were collected as part of the Santos Basin Beach Monitoring Project (PMP/BS). This project is a requirement of the Brazilian Institute for the Environment (IBAMA) for the environmental licensing of oil and natural gas production and transportation by Petrobras in the pre-salt province, according to ABIO No. 640/2015. The Enterobacterales strains studied were selected from the R3 Animal Association’s collection, which were isolated from clinical samples of eight species of Procellariiformes, resulting in 26 isolates of interest from 11 animals between 2015 and 2022. Antimicrobial susceptibility testing was performed using the disk diffusion method to identify resistance to beta-lactams, aminoglycosides, fluoroquinolones, and tetracycline. Additionally, screening for the production of Extended-Spectrum Beta-Lactamases (ESBLs) was conducted using the disk approximation method. Subsequently, PCR was performed to identify resistance genes in these isolates. Among the high-priority Enterobacterales isolates, we identified two carbapenem-resistant isolates producing New Delhi Metallo-beta-lactamase (NDM) with the blaNDM gene, 14 ESBL-producing isolates carrying the blaCTX-M1, blaTEM, and blaCTX-M9 genes, and one AmpC beta-lactamase-producing isolate harboring a gene similar to blaCMY-2. This study demonstrates the presence of high-priority bacteria in seabirds, confirming their role as sentinels of anthropogenic impacts. It highlights the fragility of marine ecosystem health, which may be contaminated with bacteria of polluting origin.