Efeito da expansão in vitro e caracterização do perfil senescente de células tronco estromais mesenquimais derivadas de tecido adiposo

Abstract

As células estromais mesenquimais (MSCs) são amplamente utilizadas na terapia celular, mas o sucesso da sua utilização está atrelado à necessidade da expansão da cultura para obtenção da quantidade viável de células para aplicação. O processo de expansão pode levar à senescência celular, caracterizada pela parada no ciclo celular, acúmulo de danos genéticos e alterações epigenéticas, além de alterações mitocondriais, morfológicas e no perfil seu perfil secretório. Esses fatores podem estimular respostas inflamatórias exacerbadas, diminuir a capacidade dessas células de identificar e migrar para o local da lesão e apresentar atividade promotora de tumor, prejudicando a segurança e a eficácia no seu uso terapêutico. Portanto, o objetivo deste trabalho foi analisar as alterações celulares associadas ao processo de senescência das MSCs derivadas do tecido adiposo humano durante o processo de expansão in vitro. Foram utilizadas amostras de gordura provenientes de descarte de cirurgia de abdominoplastia. As células foram isoladas, cultivadas e caracterizadas de acordo com a morfologia, aderência ao plástico, capacidade de diferenciação mesenquimal, e os marcadores de superfície. As MSCs foram analisadas quanto a sua capacidade de proliferação e de migração. Por fim, o perfil senescente foi analisado por meio de imunocitoquímica avaliando a presença de danos ao DNA, e, por meio da expressão de β-galactosidase. Por fim, obtivemos conhecimento sobre o perfil senescente das MSCs provenientes do tecido adiposo humano durante cultivo in vitro, sendo necessário que mais métodos de identificar a senescência sejam realizados em conjunto, uma vez que estes não são específicos, a fim de avaliarmos a sua eficácia e segurança no uso das MSCs em tratamentos futuros.