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Abstract:
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Nanopartículas lipídicas apresentam elevado potencial de aplicabilidade em sistemas de administração de fármacos e compostos bioativos, e podem ser obtidas por diversas técnicas. A escolha da técnica depende principalmente das propriedades finais desejadas e das características dos compostos a serem encapsulados. Compostos hidrofílicos podem ser encapsulados via dupla emulsão. Miniemulsões são dispersões de dois líquidos imiscíveis, que resultam em partículas estáveis (estabilidade cinética) da fase dispersa com tamanho submicrométrico, geralmente inferior a 500 nm. Emulsões duplas água/óleo/água (W/O/W) são compostas por gotas de água dispersas em outras gotas de uma fase orgânica (lipídica), sendo que estas últimas são dispersas ainda, em outra fase aquosa externa. Este projeto de pesquisa teve como objetivo o preparo de nanopartículas lipídicas, usadas futuramente para encapsulação de mRNA, através da técnica de dupla emulsão W/O/W. Mais especificamente, nanopartículas estáveis com diâmetro médio menor que 200 nm e distribuição de tamanho estreita, isto é, índice de dispersão (PDI) inferior a 0,2. O lipídeo escolhido para a produção das nanopartículas foi o Crodamol GTCC, uma mistura de triglicerídeos de cadeia média do ácido cáprico e caprílico, classificado como GRAS (Generally Recognized As Safe - Geralmente Reconhecido Como Seguro) pela FDA (Food and Drug Administration - Administração de Alimentos e Medicamentos) dos Estados Unidos da América. As emulsões foram obtidas com auxílio de um sonicador de ponteira na configuração invertida, de modo que a emulsão não esteve em contato com o sonicador, evitando assim qualquer possível contaminação. A influência de diversos parâmetros operacionais e da formulação utilizada no processo foram avaliados. Destacam-se os tempos, tamanho e forma do recipiente de sonicação, agitação, temperatura, entre outros. O tamanho das partículas e a polidispersão do sistema foram determinados através da técnica de espalhamento dinâmico de luz, sendo a estabilidade do sistema avaliada ao longo do tempo. A viabilidade celular das nanopartículas foi determinada por ensaios de MTT (3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio). Dependendo da formulação e condições experimentais utilizadas, foram obtidas nanopartículas com diâmetro médio de aproximadamente 140 nm e distribuições de tamanho estreitas (PDI ˂ 0,2), que em concentrações inferiores a 0,5 mg.mL-1 apresentaram viabilidade celular superior a 80 %, indicando que os componentes da formulação podem ser considerados não citotóxicos. Análises de estabilidade mostraram que as emulsões ficaram estáveis por períodos superiores a 5 semanas. Dessa forma, as nanopartículas lipídicas obtidas podem ser consideradas como potenciais nanocarreadores de mRNA para aplicação em diversas áreas, como por exemplo, desenvolvimento de vacinas. |
