Avaliação da atividade e expressão de enzimas antioxidantes e de parâmetros de estresse oxidativo em células de linhagem de astroglioma expostas a elevadas concentrações de cobre

Abstract

O cobre é fundamental para o bom funcionamento do organismo e para os processos metabólicos dos seres vivos, sendo parte estrutural ou cofator de inúmeras enzimas relacionadas a esses processos. No entanto, o excesso do mesmo causa citotoxidade, levando a danos oxidativos. Portanto, o objetivo desse projeto foi analisar parâmetros de estresse oxidativo, relacionados à peroxidação lipídica, geração de superóxido, e níveis de tióis proteicos (PSH) e não proteicos (NPSH) em células C6 e U-87 MG expostas ao CuSO 4 por 24h. Ainda, analisou-se a expressão das enzimas antioxidantes glutationa redutase (GR), glutationa peroxidase (GPx) e superóxido dismutase (SOD1); além de verificar a expressão de proteínas relacionadas à biogênese mitocondrial (PGC-1α e Tfam) após a exposição ao toxicante. Observou-se que o excesso do metal diminuiu os níveis de NPSH e PSH, e aumentou a formação de ERO (superóxido) nas duas linhagens celulares, enquanto o aumento da peroxidação lipídica foi verificado somente nas células C6, evidenciando o estresse oxidativo gerado pelo cobre; sendo que a linhagem C6 apresentou-se mais suscetível que a U-87 MG, pois algumas alterações foram evidenciadas em concentrações menores de CuSO 4 . Ainda, verificou-se que ocorreu diminuição na expressão de GR nas duas linhagens, mas houve um aumento da expressão de GPx nas células C6 e de SOD1 na linhagem U-87 MG expostas ao metal, além de que o CuSO4 ocasionou a formação de novas mitocôndrias através da ativação da biogênese mitocondrial em ambas as linhagens de células, levando a alterações nos níveis de expressão de Tfam ou PGC-1α. Desta forma, conclui-se que a exposição ao cobre causa estresse oxidativo nas duas linhagens, mas que a linhagem C6 é mais suscetível que a U-87 MG a elevações nas concentrações desse metal. Ainda, ocorre um aumento da expressão de GPx ou SOD1 para tentar evitar o estresse oxidativo nas duas linhagens, assim como há um aumento da biogênese de novas mitocôndrias.