Potencial antitumoral de extratos de araucaria angustifolia (bertol.) O. Kuntze em linhagens celulares de câncer de mama

Abstract

O câncer é o principal problema de saúde pública no mundo, estando entre as quatro principais causas de morte prematura na maioria dos países. Assim como na medicina humana, na veterinária ele é responsável por uma alta taxa de mortalidade. O tratamento com os quimioterápicos atuais pode causar muitos efeitos adversos como transtornos neurológicos, mielosupressão entre outros. Além disso, há um aumento progressivo de neoplasias que desenvolvem altas taxas de agressividade e resposta variável aos quimioterápicos, inclusive resistência. A descoberta de fármacos a partir de plantas medicinais tem desempenhado importante função no tratamento do câncer. A Araucaria angustifolia (Bert. O Kuntze) é encontrada principalmente no Sul do Brasil e tem um notável histórico terapêutico na medicina popular, tendo também grande importância socioeconômica e ambiental. Este estudo objetiva avaliar o potencial antitumoral de extratos de brácteas e sementes da araucária. Para isto, foi analisada a viabilidade celular nas células tumorais bem como o mecanismo de morte envolvido. A citotoxicidade foi avaliada em linhagens celulares tumorais de mama e uma linhagem não tumoral como modelo preliminar de toxicidade. Os testes foram realizados com extratos das brácteas e semente. Calculou-se a concentração citotóxica para 50% das células (CC50) e o índice de seletividade (IS) para todos os extratos. O extrato de bráctea BHA70 foi capaz de induzir citoxicidade de maneira dose-dependente na linhagem tumoral e mostrou potencial efeito citotóxico seletivo. Os resultados da avaliação do tipo de morte celular demonstraram predominância de características de apoptose induzida pelo extrato. O extrato também inibiu a migração celular em 24 e 48h de tratamento, e teve um efeito antiproliferativo. Evidenciou-se uma atuação do extrato na indução do estresse oxidativo através da redução na atividade das enzimas glutationa peroxidase, glutationa s-transferase, glutationa redutase e catalase. Na avaliação da geração de ROs o extrato BHA70 induziu a formação de EROs, sendo quase 4 vezes superior ao grupo controle. Na avaliação da expressão gênica houve redução na expressão dos genes antiapoptóticos BCL2 e BCLXL e aumento na expressão do gene pró-apoptótico BAX, sugerindo uma atuação da via intrínseca da apoptose. Os resultados apresentados sugerem que o extrato das brácteas de Araucária é promissor para a continuidade das investigações de novos fármacos antitumorais.

Abstract: Cancer is the main public health problem in the world, being among the four main causes of premature death in most countries. As in human medicine, in veterinary medicine it is responsible for a high mortality rate. Treatment with current chemotherapy drugs can cause many adverse effects such as neurological disorders, myelosuppression, among others. In addition, there is a progressive increase in neoplasms that develop high rates of aggressiveness and variable response to chemotherapy, including resistance. The discovery of drugs from medicinal plants has played an important role in the treatment of cancer. Araucaria angustifolia (Bert. o Kuntze) is found mainly in southern Brazil and has a notable therapeutic history in folk medicine, also having great socioeconomic and environmental importance. This study aims to evaluate the antitumor potential of araucaria bract and seed extracts. For this, cell viability in tumor cells was analyzed as well as the mechanism of death involved. Cytotoxicity was evaluated in breast tumor cell lines and a non-tumor cell line as a preliminary model of toxicity. The tests were performed with bract and seed extracts. The cytotoxic concentration for 50% of the cells (CC50) and the selectivity index (SI) were calculated for all extracts. The bract extract BHA70 was able to induce dose-dependent cytotoxicity in the tumor cell lineage and showed potential selective cytotoxic effect. The results of the evaluation of the type of cell death showed a predominance of characteristics of apoptosis induced by the extract. The extract also inhibited cell migration at 24 and 48h of treatment, and had an antiproliferative effect. In the evaluation of the generation of ROs, the BHA70 extract induced the formation of ROs, being almost 4 times higher than the control group. In the evaluation of gene expression, there was a reduction in the expression of the anti-apoptotic genes BCL2 and BCLXL and an increase in the expression of the pro-apoptotic gene BAX, suggesting an action of the intrinsic pathway of apoptosis. The presented results suggest that the extract of Araucaria bracts is promising for the continuation of investigations of new antitumor drugs.