Caracterização da via dos interferons durante a infecção por Pirahy virus

Abstract

A emergência e re-emergência de vírus tem cada vez mais causado preocupação na saúde pública devido à chance desses patógenos serem causadores de epidemias, como aconteceu nos últimos anos com o vírus Zika e o vírus Chikungunya. Por isso, estudos que detectam arbovírus na natureza são importantes para monitorar possíveis ameaças. No Paraná, foi isolado um novo Alphavirus de duas espécies diferentes de mosquitos, denominado Pirahy virus (PIRAV). Através de estudos in vitro, foi constatado que o PIRAV consegue se replicar com sucesso em células humanas e de outros mamíferos. Nosso objetivo com esse estudo é caracterizar a resposta imune inata, associada à via dos interferons (IFN) do tipo I e III, em células humanas infectadas por PIRAV. Para isso, utilizamos células epiteliais humanas da linhagem A549 selvagens (WT) e knockout (KO) para o gene RIGI, um sensor citoplasmático de RNA, que ativa a via dos interferons. Nossos resultados demonstram que, apesar de suscetíveis, as células humanas possuem a capacidade de combater a infecção, mesmo em grandes concentrações do vírus. Além disso, PIRAV induz a transcrição de IFNB, IFNL1 e IFIT2 em células A549 WT, mas não em células A549 RIG-I KO, o que sugere que RIG-I é o principal sensor de RNA durante a infecção por PIRAV.

The emergence and re-emergence of viruses has caused more concern for public health due to the chance that these pathogens can cause epidemics, as happened in the last few years with Zika virus e Chikungunya virus. Therefore, studies that detect arboviruses in nature are important to monitoring possible threats. Recently, a new Alphavirus has been isolated from two different species of mosquitoes, and it was called Pirahy virus (PIRAV) in Paraná, Brasil. Through in vitro studies, it was found that PIRAV can successfully replicate in human and other mammalian cells. Our goal with this study is to characterize the innate immune response associated with the interferon type I and III pathway, in human cells infected by PIRAV. To achieve that, we used a human epithelial A549 wild-type (WT) and knockout (KO) cells for the RIGI gene, a cytoplasmic RNA sensor, responsible for activation of the interferon pathway. Our results showed that human cells have the capacity to inhibit viral replication and fight infection, even with high viral input. Furthermore, PIRAV induces the transcription of IFNB, IFNL1, and IFIT2 in A549 WT, but not in A549 RIG-I KO cells, suggesting that RIG-I is the main RNA sensor during PIRAV infection.