Análise proteômica de saliva de pacientes com câncer de boca e tabagistas pela técnica de nanocromatografia líquida de alta eficiência

Abstract

Introdução: O carcinoma de células escamosas bucal (CCEB) é a neoplasia maligna mais comum em cabeça e pescoço e, na maioria dos casos, apresenta diagnóstico tardio, alta morbidade e mortalidade. O tabagismo é o principal fator de risco para o CCEB e, por isso, este estudo tem como objetivo identificar proteínas salivares com potencial de biomarcador para triagem de pacientes expostos ao tabagismo, sendo o primeiro a investigar pacientes expostos a tabagismo e sem câncer. Método: o perfil proteômico comparativo de amostras de saliva de 12 pacientes com CCEB, 9 pacientes tabagistas e sem CCEB e 11 pacientes controles não fumantes e sem neoplasia foi analisado por meio da técnica NanoLC-ESI-Q-TOF e bioinformática. Resultados: a análise revelou a presença de 778 proteínas humanas, sendo 53 concomitantemente expressas em pacientes com CCEB e tabagistas sem CCEB; destas, 5 proteínas estavam em 50% ou mais dos casos de CCEB: alfa-1-glicoproteína 1 (A1GP-1), complemento C3 (C3) e alfa-2-macroglobulina (A2M), transtirretina (TTR), subunidade alfa de hemoglobina (HBA2); ainda, 106 proteínas foram expressas concomitantemente e exclusivamente nos três grupos, sendo 4 proteínas: haptoglobina (HP), hemopexina (HPX), serotransferrina (TF), catepsina F (CTSF), presentes em pelo menos 50% dos pacientes com CCEB e menos de 33% dos pacientes do grupo controle. A análise de bioinformática indicou que, entre as 9 proteínas analisadas, havia a predominância de proteínas inflamatórias de fase aguda e que a ativação das vias relacionadas a algumas dessas proteínas, a saber: sistema complemento, via da coagulação sanguínea e ativação de via de resposta aguda, está associada à carcinogênese. Conclusão: os resultados sugerem que a saliva é um fluido importante para o diagnóstico preditivo e/ou precoce do CCEB e que as proteínas C3, A2M, A1GP-1, TTR, HP, HPX e TF, quando presentes na saliva de pacientes tabagistas, podem representar potencias biomarcardores preditivos de potencial carcinogênese para tais pacientes.

Abstract: Introduction: Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is the most common head and neck malignant neoplasm and, in most cases, presents late diagnosis, high morbidity, and mortality. Smoking is the main risk factor for OSCC, and this study aims to identify salivary proteins as potential biomarkers for screening smoking patients. Method: the comparative proteomic profile of saliva samples from 12 OSCC patients, 9 smokers without OSCC, and 11 non-smoking non-OSCC control patients was analyzed using the NanoLC-ESI-Q-TOF technique and bioinformatics. Results: the analysis revealed the presence of 778 human proteins. 53 of them were exclusively expressed in OSCC patients and smokers without OSCC, with 5 proteins observed in more than 50% OSCC patients: alpha-1-glycoprotein 1 (A1GP-1), complement C3 (C3), alpha-2-macroglobulin (A2M), transthyretin (TTR) and hemoglobin alpha subunit (HBA2). 106 proteins were expressed in the three groups, 4 of which: haptoglobin (HP), hemopexin (HPX) serotransferrin (TF) and cathepsin F (CTSF) were present in at least 50% of patients with OSCC and less than 33% of patients in the group control. The bioinformatics analysis indicated that, among the 9 proteins analyzed, there was a predominance of acute phase proteins and the activation of pathways related to some of these proteins, namely: complement system, blood coagulation pathway, activation of acute response pathway, is associated with carcinogenesis. Conclusion: the results suggested that saliva is an important fluid for the predictive and/or early diagnosis of OSCC and that proteins C3, A2M, A1GP-1, TTR, HP, HPX and TF, when present in the saliva of smokers, may represent potential biomarkers predictive of carcinogenesis potential for such patients.