A modulação da resposta imune periférica em agricultores expostos a múltiplos agrotóxicos

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A modulação da resposta imune periférica em agricultores expostos a múltiplos agrotóxicos

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Title: A modulação da resposta imune periférica em agricultores expostos a múltiplos agrotóxicos
Author: Pereira, Carolina Hilgert Jacobsen
Abstract: A exposição ocupacional aos agrotóxicos tem sido considerada um fator predisponente a distúrbios do sistema imunológico. Imunossupressão, autoimunidade, câncer em vários órgãos e outras doenças em pessoas que trabalham expostas a esses produtos tem sido relatado. Este estudo teve como objetivo investigar as células do sistema imune e citocinas plasmáticas em 40 agricultores submetidos à exposição ocupacional a múltiplos agrotóxicos por, pelo menos, 15 anos. Paralelamente, foi avaliado para fins comparativos, um grupo controle sem histórico de exposição. Células circulantes em sangue periférico foram identificadas pelas características de dispersão de luz e por combinações de marcadores celulares em análise por citometria de fluxo utilizando o equipamento FACS Canto II. As células foram identificadas de acordo com os fenótipos como leucócitos totais, monócitos (clássicos, intermediários e não clássicos), neutrófilos (imaturos e maduros), eosinófilos, basófilos e linfócitos. Os linfócitos foram subdivididos em linfócitos T helper, linfócitos T citotóxicos, linfócitos T reguladores, linfócitos B, natural killer e natural killer T. Os linfócitos T foram subclassificados como T naïve, T de memória central, T efetores de memória e T efetores de memória terminal. As células B foram subdivididas em células B imaturas e células B maduras, sendo estas últimas subclassificadas de acordo com seu estágio maturativo. Células dendríticas circulantes (plasmacitoides e mieloides) também foram quantificadas utilizando o painel de anticorpos. Concentrações das citocinas plasmáticas IL-17 A, IFN-?, TNF, IL-10, IL-6, IL-4 e IL-2 foram avaliadas por citometria de fluxo utilizando o kit BD? Cytometric Bead Array (CBA Human Th1/Th2/Th17) (Beckton Dickinson, EUA). Os resultados mostraram aumento significativo dos valores relativos e absolutos de neutrófilos imaturos e monócitos e aumento absoluto das células dendríticas, bem como do total de células T, células T citotóxicas de memória central e efetoras de memória nas amostras do grupo de agricultores. Em contrapartida, nesse grupo houve diminuição significativa dos valores absolutos de células B maduras e de linfócitos T efetores de memória terminal. Além disso, foi observado o aumento significativo da concentração de IL?6 no mesmo grupo. Devido ao constante estímulo antigênico que ocorre durante a exposição aos agrotóxicos e o consequente recrutamento de células apresentadoras de antígenos na pele e trato respiratório, as células dendríticas e monócitos estão circulando em maiores quantidades. Nos órgãos linfoides secundários, as células B podem estar com a vida útil aumentada devido aos sinais de sobrevivência gerados pela ligação às células dendríticas que também se encontram nesse local, fazendo com que diminuam na circulação. Os resultados apresentados no presente estudo sugerem que os agricultores avaliados estão mais sujeitos a desenvolver problemas de saúde em função das alterações nas quantidades das células imunes avaliadas.Abstract: Occupational exposure to pesticides has been considered a predisposing factor to immune system disorders. Immunosuppression, autoimmunity, cancer of various organs and other diseases in working people exposed to these products have been reported. This study aimed to investigate the immune system cells and plasma cytokines in 40 farmers subjected to occupational exposure to multiple pesticides for at least 15 years. At the same time, a control group with no history of exposure was evaluated for comparative purposes. Circulating cells in peripheral blood were identified by light scattering characteristics and by combinations of cell markers analyzed by flow cytometry using the FACS Canto II equipment. Cells were identified according to phenotypes such as total leukocytes, monocytes (classic, intermediate and non-classical), neutrophils (immature and mature), eosinophils, basophils and lymphocytes. Lymphocytes were subdivided into helper T lymphocytes, cytotoxic T lymphocytes, regulatory T lymphocytes, B, natural killer and natural killer T lymphocytes. T lymphocytes were subclassified as naïve T, central memory T, memory effector T and memory effectors terminal. B cells were subdivided into immature B cells and mature B cells, the latter being subclassified according to their maturation stage. Circulating dendritic cells (plasmacytoid and myeloid) were also quantified using the antibody panel. Plasma cytokine concentrations IL-17A, IFN-?, TNF, IL-10, IL-6, IL-4 and IL-2 were assessed by flow cytometry using the BD? Cytometric Bead Array kit (CBA Human Th1/Th2 /Th17) (Beckton Dickinson, USA). The results showed a significant increase in the relative and absolute values of immature neutrophils and monocytes and an absolute increase in dendritic cells, as well as in the total number of T cells, central memory cytotoxic T cells and memory effectors in the samples from the group of farmers. On the other hand, in this group, there was a significant decrease in the absolute values of mature B cells and end-memory effector T lymphocytes. Furthermore, a significant increase in the concentration of IL-6 was observed in the same group. Due to the constant antigenic stimulation that occurs during exposure to pesticides and the consequent recruitment of antigen-presenting cells in the skin and respiratory tract, dendritic cells and monocytes are circulating in greater amounts. In secondary lymphoid organs, B cells may have an increased lifespan due to survival signals generated by the attachment to dendritic cells that are also found in this location, causing them to decrease in circulation. The results presented in this study suggest that the evaluated farmers are more likely to develop health problems due to changes in the amounts of the evaluated immune cells.
Description: Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2021.
URI: https://repositorio.ufsc.br/handle/123456789/231088
Date: 2021


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