Levantamento de fauna de flebotomíneos (Diptera: Psychodidae) e infecção natural por Leishmania spp. no município de Tubarão, Santa Catarina, Brasil

Abstract

As leishmanioses são doenças provocadas por protozoários do gênero Leishmania spp., que podem acometer tanto humanos quanto animais, podendo levar à morte. A transmissão do patógeno ocorre por meio da picada de fêmeas infectadas do inseto vetor flebotomíneo (Diptera: Psychodidae). No corpo do hospedeiro vertebrado, os parasitos vivem e se multiplicam intracelularmente em células do sistema fagocítico mononuclear, podendo causar distintas formas clínicas da doença. Em dezembro de 2018, no município de Tubarão/SC, pela primeira vez foram identificados casos de cães com leishmaniose visceral, não sendo possível, após investigação, confirmar ou descartar a autoctonia dos casos. Infecções por Leishmania em cães desempenham um papel crucial na transmissão do agente etiológico para humanos. Deste modo, estudou-se a fauna de flebotomíneos do Centro de Controle de Zoonoses do município de Tubarão, local onde foram identificados os animais positivos para o protozoário. Coletas em quatro pontos distintos foram realizadas durante 16 meses, e a infecção natural destes dípteros por Leishmania spp. foi avaliada por meio da técnica de PCR, tendo como alvo a região ITS1 do rDNA, seguida de sequenciamento para a identificação das espécies. Além da identificação morfológica, os insetos positivos passaram por identificação molecular confirmatória. Todos os cães abrigados na instituição foram testados para Leishmania por meio de técnica não invasiva (Swab ocular), seguida de PCR e sequenciamento. Ademais, foram correlacionados fatores ambientais (temperatura, umidade relativa do ar e precipitação pluviométrica) com a abundância total e o sexo dos referidos insetos. No total, 3419 flebotomíneos foram coletados, sendo 72.5% machos e 27.5% fêmeas. A espécie mais abundante foi Nyssomyia neivai (85.74%), seguida de Migonemyia migonei (13.30%), Pintomyia fischeri (0.82%), Brumptomyia spp. (0.10%) e Evandromyia edwardsi (0.04%). A taxa de infecção natural por Leishmania foi de 0.39%, sendo todos os exemplares Leishmania infantum. Os flebotomíneos naturalmente infectados pertenciam à espécie Ny. neivai, identificação obtida tanto na análise morfológica quanto na molecular. No total, 47 cães foram analisados, e dois animais foram identificados com L. infantum, gerando uma taxa de infecção de 4,2%. Constatou-se correlação positiva entre a abundância total, machos, fêmeas e temperatura, e coeficientes de correlação de r = 0.50; r = 0.48; r = 0.55, respectivamente, bem como entre valores de p<0,05 para todas as referidas análises. Na ausência de Lutzomyia longipalpis em Santa Catarina, principal vetor da Leishmania infantum no Brasil, acredita-se que a Nyssomyia neivai seja o potencial vetor na região sul, podendo estar atuando como transmissor do patógeno causador da leishmaniose visceral no Estado.

Abstract: Leishmaniasis are diseases caused by protozoans of the genus Leishmania spp., such diseases can compromise humans and animals, and in severe cases can also lead to death. The pathogen transmission occurs through the bite of the infected female insect vector, the phlebotomine (Diptera: Psychodidae). In the vertebrate host?s body, the parasite lives and multiply intracellularly in macrophages, which leads to distinct clinical manifestations of the disease. In December 2018, the municipality of Tubarão, Santa Catarina, identified for the first-time cases of dogs infected with visceral leishmaniosis. After investigation, it was not possible to confirm whether the cases were autochthones or not. The infections of dogs with Leishmania play a pivotal role in the transmission of the etiological agent to humans. In this matter, our group studied the phlebotomine fauna of the Zoonoses Control Center of the municipality of Tubarão, where the animals were first identified positive with the protozoan. The collection occurred in four distinct sites for 16 months. The natural infection of the dipteran with Leishmania spp. was through the PCR assay targeting regions of the rDNA, ITS1, then we sequenced the samples to identify species. The positive insects were identified using morphological characteristics with molecular confirmation. In addition, we tested for Leishmania every dog sheltered in the institution through a noninvasive collection technique (ocular swab), tested with PCR assay, and confirmed by sequencing. Besides, we correlated environmental factors (temperature, air relative humidity, and precipitation) with the insects? total abundance and sex. A total of 3419 phlebotomine were collected, which 72.5% were male and 27.5% were female. The most abundant species was Nyssomyia neivai (85.74%), followed by Migonemyia migonei (13.30%), Pintomyia fischeri (0.82%), Brumptomyia spp. (0.10%), and Evandromyia edwardsi (0.04%). The natural infection rate by Leishmania was 0.39% and all infections were identified as caused by Leishmania infantum. The infected phlebotomine were identified though morphological and molecular analysis as Ny. neivai. We analyzed a total of 47 dogs and identified two animals infected with L. infantum, resulting in an infection rate of 4.2%. We found a positive correlation between total abundance, male, female, and temperature, with correlation coefficients of r = 0.50; r =0.48; r = 0.55. respectively. All statistical analysis considered p<0.05. In the absence of the confirmed vector of Leishmania infantum in Santa Catarina, Lutzomyia longipalpis, we believe that Nyssomyia neivai could be the possible vector in the South Region of Brazil. This species acts in the transmission of the pathogen that causes visceral and integumentary leishmaniasis in the Santa Catarina State.