Efeito da solução ativadora sobre a motilidade do sêmen crioconservado de Rhamdia quelen (Quoy & Gaimard, 1824)

Abstract

Alguns fatores ambientais, como as concentrações de íons e a pressão osmótica podem afetar a ativação dos espermatozoides dos peixes, a duração da sua motilidade e as velocidades do seu deslocamento. O presente estudo teve por objetivo avaliar o efeito de soluções ativadoras com diferentes osmolaridades sobre o sêmen crioconservado do jundiá Rhamdia quelen (Quoy & Gaimard, 1824). Para tanto, amostras de sêmen foram congeladas com solução crioprotetora (100ml/l metanol, 50g/l frutose, 50g/l leite em pó), e após descongelamento o efeito de duas soluções ativadoras foi avaliado. As soluções ativadoras utilizadas foram bicarbonato de sódio (NaHCO3) e cloreto de potássio (KCl), nas osmolaridades 120, 200, 300 e 400 mOsm l-1. A ativação com água deionizada foi utilizada como tratamento controle. O sêmen de reprodutores foi coletado em campo, sem o uso de indução hormonal, no mês de junho/2019. Foram utilizados machos adultos selvagens (n =4) em idade reprodutiva, de um plantel de reprodutores provenientes de captura do Rio Uruguai. As amostras de sêmen fresco foram caracterizadas individualmente e posteriormente foi preparado um pool, que foi diluído na proporção 1:4 (sêmen: solução crioprotetora), envasado em pallets de 0,25 ml, resfriado e congelado em vapor de nitrogênio, e posteriormente foi armazenado em botijão de nitrogênio líquido. Para a descongelação os pallets foram imersos em água a 24 °C por 10 s. A análise da motilidade foi realizada com o software computacional de análise espermática (CASA). O tratamento utilizando KCl produziu as maiores taxas de motilidade e velocidade curvilínea, enquanto a velocidade em linha reta apresentou maiores valores para os tratamentos utilizando NaHCO3. As soluções ativadoras contendo K+ e Na+ em concentrações a partir de 300 mOsm l-1 afetaram negativamente a motilidade de sêmen crioconservado de R. quelen reduzindo de forma severa a motilidade dos espermatozoides.

Abstract: Some environmental factors, such as ion concentrations and osmotic pressure, can affect the activation of fish sperm, the duration of their motility and the speed of their displacement. The present study aimed to evaluate the effect of activating solutions with different osmolarities on the cryopreserved semen of the jundiá Rhamdia quelen (Quoy & Gaimard, 1824). For that, semen samples were frozen with cryoprotectant solution (100ml / l methanol, 50g / l fructose, 50g / l milk powder), and after thawing the effect of two activating solutions was evaluated. The activating solutions used were sodium bicarbonate (NaHCO3) and potassium chloride (KCl), in osmolarities 120, 200, 300 and 400 mOsm l-1. Activation with deionized water was used as a control treatment. The semen from breeders was collected in the field, without the use of hormonal induction, in June / 2019. Wild adult males (n = 4) of reproductive age were used, from a breeding stock from the Uruguay River. The fresh semen samples were individually characterized and then a pool was prepared, which was diluted in a 1: 4 ratio (semen: cryoprotectant solution), filled in 0.25 ml pallets, cooled and frozen in nitrogen vapor, and was subsequently stored in liquid nitrogen canister. For defrosting, the pallets were immersed in water at 24 ° C for 10 s. The analysis of motility was performed with the computational sperm analysis software (CASA). The treatment using KCl produced the highest motility rates and curvilinear speed, while the straight line speed presented the highest values for the treatments using NaHCO3. Activator solutions containing K+ and Na+in concentrations from 300 mOsm l-1 negatively affected the motility of R. quelen cryopreserved semen, severely reducing sperm motility.