Avaliação de protocolos para extração de DNA e isolamento de microrganismos resistentes aos antimicrobianos encontrados em transportes de pacientes

Abstract

O desenvolvimento de resistência bacteriana aos antimicrobianos é um fenômeno natural, entretanto, o maior consumo de antimicobrianos tem sido apontado como o principal responsável pelos altos níveis de resistência atuais. O trabalho desenvolvido se baseia em avaliar protocolos para coleta e extração de DNA e isolamento de microrganismos resistenste aos antimicrobianos (MRA) a partir da superfície de veículos de transportes de pacientes. Foram realizados diversos testes para a determinação do kit de extração do DNA e ao mesmo tempo foi realizado o processo de identificação das colônias isoladas utilizando-se testes bioquímicos convencionais e metodologia MALDI-TOF, o que proporcionou a realização do teste de sensibilidade aos antimicrobianos (TSA) e a formação do biorreposiório com as colônias obtidas. O swab da linha SRK flocado da Copan Italia® para a coleta de amostras de superfície nos trasportes de pacientes e o ZymoBIOMICS TM DNA Miniprep Kit foram escolhidos para a realização da extração do DNA total das amostras obtidas. Foram isoladas no total 33 colônias de veículos de transportes de pacientes das cidades de Caçador e Zortéa (SC), sendo 45% Staphylococcus spp., 12% Acinetobacter spp. e 18% Enterococcus spp. As bactérias isoladas são características de colonização da pele, via respiratória, do aparelho digestivo e urinário em seres humanos. Outras, apresentam colonização oriunda do solo e superfícies ambientais. Os isolados apresentaram resistência acima de 30% aos beta-lactâmicos e aos aminoglicosídeos, as principais classes utilizadas para o tratamento de infeções bacterianas. A maioria das colônias foram caracterizadas como multidroga resistentes (MDR – multidrug- resistant) e não foram identificados os fenótipos MLSB e ESBL nas colônias analisadas. As características das bactérias identificadas permitem concluir que sua presença nos transportes de pacientes podem indicar de condições de higiene inadequadas.