"Avaliação dos mecanismos celulares e moleculares do fator de crescimento de fibroblastos tipo 2 (FGF2) na migração, proliferação e diferenciação das células da crista neural truncal de codornas (Coturnix coturnix japônica)"

Abstract

A crista neural (CN) é uma estrutura embrionária transitória, comum a todos os vertebrados, que se origina da parte dorsal do tubo neural e coloniza o embrião em desenvolvimento, dando origem a diversas estruturas como células gliais, neurônios e os melanócitos da pele. As células da CN diferenciam em resposta a uma complexa rede de sinalização presente no microambiente, incluindo a sinalização de FGF2 e fatores de transcrição como Sox10, FoxD3 e Mitf. O FGF2, um fator mitogênico envolvido nos processos da CN desde a sua indução até a diferenciação final, pode representar uma importante ferramenta no tratamento de neurocristopatias. Neste trabalho, foi demonstrado em culturas secundárias de células da CN da região truncal (CNT) de embriões de aves, que o FGF2 aumenta a população de células da CN através do aumento da proliferação e, principalmente, através do aumento da sobrevida das células em culturas secundárias. Contudo, o tratamento com FGF2 não alterou o halo de migração e proliferação celular durante a fase de migração em culturas primárias. As células da CNT tratadas com FGF2 e estimuladas à diferenciação apresentaram maior sobrevida dos progenitores com capacidade de diferenciação em melanócitos. Pode-se propor assim, que o FGF2 aumenta a sobrevida dos progenitores de melanócitos através da modulação da expressão dos fatores de transcrição Sox10, FoxD3 e Mitf. Além disso, o FGF2 não alterou a potencialidade das células da CNT, porém, estimulou a propagação de progenitores mesenquimais da CNT, fenótipos estes que são gerados in vivo apenas pelas células da CN da região cefálica (CNC), através de várias passagens sem que houvesse prejuízo aos fenótipos neurais. Ademais, as culturas tratadas com FGF2 apresentaram vários gânglios neuronais e maior capacidade de diferenciação em células gliais por até 5 passagens. Este trabalho acrescenta informações para o avanço na compreensão do processo de diferenciação das células da CN embrionária e é importante para o aperfeiçoamento tecnológico na busca de prevenir ou restaurar danos causados por enfermidades relacionadas às células da CN, como melanoma e vitiligo.

Abstract : Neural crest (NC) is an embryonic and transitory structure of vertebrates; it arises at the dorsal region of neural tube and colonizes the developing embryo giving rise to various cell phenotypes such as glial cells, neurons and the melanocytes from the skin. NC cells differentiate in response to a complex signaling network present in microenvironment, including FGF2 signaling and transcription factors such as Sox10, FoxD3 and Mitf. FGF2, a mitogenic factor involved in NC processes from induction to the complete cell differentiation, could represent an important tool in treatment of neurocristopathies. In this work, it was demonstrated in NC cell cultures of the trunk region (TNC) from avian embryos, that FGF2 increases cell population through the increase in cell proliferation and specially through increasing cell survival in secondary cultures. Nevertheless, FGF2 treatment did not alter cell migration and proliferation during the migration phase in primary cultures. TNC cells treated with FGF2 and stimulated to differentiation showed increased survival of progenitors endowed with melanocytic phenotype. We suggest FGF2 increases the melanocyte progenitors by modulating the expression of the transcription factors Sox10, FoxD3 and Mitf. Furthermore, FGF2 did not modify the potentiality of TNC cells, but, it did stimulate the propagation of TNC mesenchymal progenitors, through several passages without losing the neural phenotypes. The mesenchymal phenotypes are generated in vivo by NC from cephalic region (CNC) and not by TNC. In addition, the treated cultures showed several neurons ganglia and increased differentiation in glial cells up to 5 passages. This work adds information to move forward the understanding of the differentiation process of embryonic NC cells and it is important for chasing advanced technologies to avoid or restore injuries caused by NC related illness, ass melanoma and vitiligo.