Perfil de enzimas digestivas em juvenis do camarão-branco-do-pacífico Litopenaeus vannamei alimentados com dietas contendo diferentes níveis de substituição de farinha de peixe por farinha das larvas do inseto Tenebrio molitor

Abstract

A carcinicultura é um dos setores da aquicultura mais rentáveis e o camarão branco do pacífico, Litopenaeus vannamei (Decapoda: Penaeidae) é uma das espécies mais cultivadas mundialmente devido à sua rusticidade, rápido crescimento, fácil manejo e aceitação comercial. O Brasil encontra-se como um grande produtor, favorecido por sua ampla faixa costeira, porém alguns fatores como enfermidade virais e insumos acarretam custos na produção, pois demandam gastos altos de manutenção. A nutrição de espécies é um deles, sendo considerada um grande entrave da carcinicultura, por seu alto custo, em particular devido à utilização da farinha de peixe como um dos componentes nas rações. Contudo, tem-se buscando formas econômicas e sustentáveis de fontes proteicas alternativas para substituição da farinha de peixe. Para isso, tem-se elaborado estudos no fortalecimento do uso de farinha de inseto na alimentação de camarões sem perdas financeiras. O presente trabalho tem por objetivo analisar o perfil de enzimas digestivas de juvenis da espécie de camarões marinhos L. vannamei (n=9), com peso inicial de 4,42 ± 0,02g (média, ± desvio padrão) peso final de 9,23 ± 0,31g (média, ± desvio padrão) e com um ganho de peso de 4,81± 0,30 g (média, ± desvio padrão). Os camarões alimentados com farinhas das larvas do inseto Tenebrio molitor, em diferentes níveis de substituição, com 25%, 50%, 75% e 100% e o controle (farinha de resíduo de salmão). O experimento foi realizado no Laboratório de Camarões Marinhos da UFSC (LCM) iniciando com o cultivo dos camarões em tanques de engorda fornecendo diariamente as rações durante 42 dias. Após esse período de engorda, os animais foram eutanasiados, sendo dissecados o hepatopâncreas e esses mantidos em freezer a -25 ºC em tubos cônicos contendo 1 mL de solução salina 3%. Os hepatopâncreas foram homogeneizados e centrifugados para a realização dos ensaios enzimáticos para determinação de atividades proteolíticas do tipo tripsina (substrato usado bz-R-pNA), quimotripsina (substrato usado suc-AAPF-pNA) e sobre o substrato proteico azoalbumina, além de amilases e lipases. Zimogramas utilizando-se géis SDS-PAGE foram obtidos para fracionamento das atividades proteolíticas e amilásicas. Os dados obtidos mostram que houve um ganho de peso e que a taxa de sobrevivência não foi afetada com a substituição de farinha de inseto na dieta dos camarões. Os resultados deatividade absoluta de tripsina, quimotripsina, lipases e amilases demonstram não haver diferenças significativas entre o controle e os tratamentos, assim como nos padrões das atividades enzimáticas encontradas nos zimogramas. Já as determinações das atividades especificas de quimotripsina e amilases demonstraram diferenças significativas entre a dieta contendo 25% de substituição e a dieta controle. Já na atividade sobre azoalbumina, foi encontrada diferença nos tratamentos 75% para atividade absoluta e 25% para atividade especifica, e no tratamento com 100% para as duas atividades.

Abstract : Shrimp farming is one of the most profitable sectors of aquaculture, and the white Pacific shrimp, Litopenaeus vannamei (Decapoda: Penaeidae) is one of the most cultivated species worldwide due to its rusticity, rapid growth, easy handling and commercial acceptance. Brazil is a major producer, favored by its wide coastal area, but factors such as viral illnesses and inputs cause costs in production, as they demand high maintenance costs. The nutrition of species is one of them, being considered a great hindrance of shrimp farming, due to its high cost, in particular due to the use of fish meal as one of the components in the feeds. However, we have been looking for economic and sustainable forms of alternative protein sources for fish meal substitution. For this purpose, studies have been carried out to strengthen the use of insect meal in shrimp feed without financial losses. The objective of the present work was to analyze the digestive enzymes profile of juveniles of the marine shrimp L. vannamei (n = 9), with initial weight of 4.42 ± 0.02 g (mean, standard deviation), 23 ± 0.31 g (mean ± standard deviation) and a weight gain of 4.81 ± 0.30 g (mean ± standard deviation). The shrimp fed the larvae of the mealworm Tenebrio molitor, at different replacement levels, with 25%, 50%, 75% and 100% and control (commercial fish meal). The experiment was carried out in the Laboratório de Camarões Marinhos da UFSC (LCM), starting with the cultivation of shrimp in fattening tanks, providing daily feed for 42 days. After this fattening period, the animals were euthanized and the hepatopancreas were dissected and kept in a freezer at -25 ºC in conical tubes containing 1 mL of 3% saline solution. The hepatopancreas were homogenized and centrifuged for the enzymatic assays to determine protease activities trypsin-like (bz-R-pNA as the substrate), chymotrypsin-like (suc-AAPF-pNA as the substrate) and against the proteinaceous substrate azoalbumin, as well as amylases and lipases. Zymograms using SDS-PAGE gels were obtained for fractionation of proteolytic and amylase activities. The data obtained showed that there the a weight gain and the survival rate were not altered with the incorporation of insect meal in the shrimp diet in addition. The results of the absolute activity of trypsin, chymotrypsin, lipases and amylase demonstrated no significant differences between control and treatments, as well as in the patterns of enzymatic activities found in thezymograms. The determinations of the specific activities of chymotrypsin and amylases showed significant differences between the diet containing 25% of incorporation and the control. In the azoalbumin activity, a difference was found in treatments 75% for absolute activity and 25% for specific activity, and in the treatment with 100% for both activities.