Desenvolvimento de um imunossensor para detecção de antígeno prostático específico

Abstract

O antígeno prostático específico (Prostate-Specific Antigen - PSA), produzido pelas glândulas prostáticas, está presente principalmente no sêmen e em pequena quantidade também no sangue. Este antígeno atua como um possível indicador do câncer de próstata (CP), já que sua concentração no sangue está associada à presença da doença. Dentre as metodologias alternativas para detecção de CP, destaca-se a construção de novos imunossensores para determinação de PSA, os quais podem contribuir para o diagnóstico precoce do CP de uma maneira rápida e menos invasiva para o paciente. Por esta razão, o objetivo deste trabalho foi desenvolver um novo imunossensor eletroquímico label-free para detecção de PSA, utilizando um eletrodo de ouro contendo filme de cristal líquido (brometo de (E)-1-decil-4-((4-(deciloxi)fenil)diazenil)piridínio) como sonda redox, nanopartículas de ouro estabilizadas em heparina (AuNP-Hep) para imobilização do anticorpo (Ab-PSA) e Nafion® para fixação do filme na superfície do sensor. O imunossensor proposto foi otimizado utilizando a técnica de voltametria de onda quadrada, e as melhores condições experimentais obtidas foram: frequência de 50,0 Hz, amplitude de 60,0 mV, incremento de 5,0 mV, solução tampão fosfato salino (0,01 mol L-1, pH 7,4), tempo de imobilização de 30 min para o anticorpo e tempo de incubação de 30 min para o antígeno (amostra). Foi construída uma curva de calibração relacionando a supressão da corrente (SC) da sonda redox em função da concentração de PSA. A curva de calibração nas melhores condições de trabalho apresentou uma faixa linear de 1 a 5 ng mL-1 de PSA, a equação da regressão linear foi de: SC = 22,17 (±1,43) + 11,51 (±0,46) [PSA], coeficiente de correlação (R²) de 0,994 e limite de detecção de 0,37 ng mL-1. O imunossensor proposto foi utilizado com sucesso na determinação de PSA em amostras simuladas de plasma sanguíneo a partir da supressão do sinal da sonda de cristal líquido, acompanhada por voltametria de onda quadrada. Além disso, conclui-se que o imunossensor proposto demonstrou uma boa sensibilidade à concentração do antígeno na faixa necessária para detecção da doença, podendo auxiliar no diagnóstico precoce do CP.