Envolvimento de canais de potássio na inibição da proliferação de células de mastocitoma pelo óxido nítrico

Abstract

Vários efeitos do [óxido nítrico] devem-se à ativação de [guanilato ciclase] ou alteração do funcionamento de [canais de potássio]. O envolvimento destes mecanismos no efeito anti-proliferativo do NO foi investigado em duas linhagens de mastocitoma murinas, P815 e MCP-5. O NO (em forma de doadores SNAP 10-100 µM e GSNO 100-1000 µM) inibiu de maneira concentração e tempo dependente a [proliferação] de ambas as linhagens celulares, com efeito máximo em torno de 50%, induzindo uma interrupção do ciclo celular na fase de mitose. As células incubadas com o doador de NO por 4 ou 24 h tiveram a proliferação inibida da mesma forma, indicando que o efeito causado pelo NO é irreversível. Os bloqueadores de canais de K+, tetraetilamônio (TEA; bloqueador não-seletivo; 10-1000 µM); 4-aminopiridina (4-AP; bloqueador de canais sensíveis à voltagem; 1-100 µM) e as toxinas caribdotoxina, iberiotoxina e apamina (bloquedores de subtipos de canais de potássio dependentes de cálcio; 100 nM), reverteram completamente o efeito anti-proliferativo do NO. Entretanto, o bloqueador de canais de K+ ATP-dependentes (glibenclamida; GBN; 10-1000 µM) não alterou a inibição da proliferação induzida pelo NO. O efeito do NO não foi mimetizado pelo 8-Br-cGMP (um análogo permeante do cGMP), nem alterado por um inibidor seletivo da guanilato ciclase solúvel (ODQ; 1-10 µM). Drogas que interferem com o citoesqueleto não afetaram o efeito anti-proliferativo do NO. Conclui-se que o NO inibe a proliferação celular irreversivelmente por uma via dependente de canais de potássio, porém independente da atividade da enzima guanilato ciclase e do citoesqueleto.