Internalização celular e atividade antiglioma da lectina ConBr

Abstract

O projeto intitulado “Caracterização da internalização da lectina de Dioclea violacea (DvL) e indução de estresse de retículo endoplasmático em células de glioma C6” teve como proposta inicial investigar os efeitos de DvL e outras lectinas leguminosas em células de glioma. Os gliomas constituem os tumores primários malignos do sistema nervoso central mais prevalentes em adultos, sendo o glioblastoma (GBM) a forma mais agressiva. O tratamento do GBM inclui cirurgia, radioterapia e quimioterapia com temozolomida. Entretanto, a elevada capacidade de invasão e resistência do GBM levam a um prognóstico desfavorável e reforçam a necessidade de novas estratégias antiglioma. Entre as diversas alterações moleculares observadas no GBM, observa-se a modificação do padrão de glicosilação da superfície celular. Nesse contexto, as lectinas vegetais destacam-se por sua capacidade de reconhecer glicanos e modular processos celulares, apresentando potencial antitumoral. Durante o desenvolvimento do projeto, houve uma adaptação no plano de atividades, com a substituição da lectina inicialmente prevista, DvL, pela lectina ConBr, purificada das sementes de Canavalia brasiliensis. A partir dessa adaptação, o trabalho teve como objetivo investigar os efeitos da ConBr sobre a viabilidade celular e caracterizar sua internalização em células de glioma C6. Para isso, células C6 foram tratadas com ConBr nas concentrações de 10, 30 e 50 µg/mL por 24 horas. A viabilidade celular foi avaliada pelo ensaio de MTT e a morfologia por microscopia de campo claro. A internalização foi investigada por microscopia confocal utilizando ConBr conjugada ao fluoróforo FITC, nos tempos de 1, 3 e 6 horas. Os resultados demonstraram redução da densidade celular e alterações morfológicas compatíveis com dano celular após o tratamento, acompanhadas de redução significativa da viabilidade celular. Na microscopia confocal, observou-se aumento progressivo do sinal de fluorescência verde no interior das células entre 1 e 6 horas, evidenciando a internalização da ConBr-FITC pelas células C6. Em conjunto, os resultados demonstram que a ConBr apresenta efeito citotóxico e é internalizada por células de glioma C6, fornecendo novas evidências para a compreensão de seu mecanismo de ação. Estudos adicionais são necessários para esclarecer as vias celulares envolvidas e a relação entre a internalização e os efeitos antiglioma da lectina.