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Abstract:
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Este relatório descreve as atividades desenvolvidas durante o estágio supervisionado no setor de Pesquisa e Desenvolvimento da ARK P&D em Biologia Molecular S.A, com sede localizada em São Paulo. O objetivo principal foi a expressão de uma proteína extracelular recombinante, utilizando uma linhagem de levedura geneticamente modificada em processo de fermentação de precisão. Foram realizadas etapas de preparo de meios e soluções, manutenção de microrganismos, transformação genética de bactérias competentes e leveduras, extração plasmidial (miniprep), cultivo em biorreator de bancada e análises de consumo de substratos (glicerol e metanol) por HPLC e expressão proteica por SDS-PAGE. Os resultados mostraram crescimento celular adequado com massa seca máxima de 6,5 g/L, porém o consumo de glicerol foi incompleto, com concentrações residuais de aproximadamente 16 g/L ao final do cultivo, indicando que a fase de indução com metanol foi iniciada antes do esgotamento do substrato. A proteína recombinante foi detectada por SDS-PAGE como uma banda adicional de aproximadamente 66 kDa em amostras induzidas, embora em baixa intensidade. O estágio contribuiu significativamente para a formação profissional, consolidando conhecimentos em biologia molecular, fermentação e análises bioquímicas. |
