Associação da invasão perineural com o processo de transição epitélio-mesênquima e seu impacto prognóstico no carcinoma epidermoide de boca

Abstract

Introdução: O carcinoma epidermoide de boca (CEB) é a neoplasia maligna mais comum da cavidade bucal. Geralmente, seu diagnóstico ocorre em estágios avançados, impactando diretamente no prognóstico. Após o diagnóstico, o estadiamento clínico do CEB é realizado utilizando o sistema tumor-nódulo-metástase (TNM) para a determinar o prognóstico e planejar o tratamento. Entretanto, outros parâmetros histológicos também podem ser explorados para prever o comportamento biológico do CEB. Dentre esses destaca-se a invasão perineural (IPN), que pode ser influenciada pela transição epitélio-mesênquima (TEM). A TEM está relacionada a alterações celulares que facilitam a migração e invasão das células neoplásicas de invadirem estruturas, como invasão linfovascular e nervos. Objetivos: Avaliar se a IPN pode ser um fator importante no prognóstico dos pacientes com CEB, e investigar o papel da TEM nesse processo de invasão. Metodologia: A amostra foi composta por 44 casos de CEB. Foram coletadas informações demográficas, clínico- patológicas, além do tempo de segmento (acompanhamento). Os casos selecionados foram classificados em relação à diferenciação tumoral, intensidade de brotamentos tumorais (BT), pior padrão de invasão (PPI) e espessura tumoral (ET), com auxílio da imunomarcação com anti-pan-citoqueratina (AE1/AE3). Realizou-se também a classificação de Elsereragy, que considera a diferenciação tumoral e a intensidade de BT. A IPN foi investigada por dupla marcação imuno-histoquímica (DM) para os antígenos AE1/AE3 e S100, e Snail1 e S100. Também foi realizada uma estratificação de risco para a IPN em todos os casos. Para avalição da TEM, o Snail1 foi classificado como alta ou baixa expressão, conforme intensidade e proporção de marcação nuclear. Foram analisadas células no front de invasão e/ou hotspot, além das células na área da IPN, estas últimas identificadas por meio da DM com S100. Foram aplicados testes estatísticos adequados para cada variável, adotando-se significativo os resultados com a<0,05. Resultados: Dos 44 casos de CEB incluídos, a maioria envolveu homens, 32 (72,73%). A idade média observada foi de 57,88±10,99 anos. Predominaram casos de CEB bem diferenciados, 30 (68,18%); com alta intensidade de BT, 34 (77,27%); ET alta, 34 (77,28%); e PPI tipo 5, 21 (47,73%). Pela classificação de Elseragy, 34 (77,27%) foram reclassificados como grau III revisado. Na estratificação de risco, 13 (29,54%) casos foram de baixo risco, 25 (56,18%) de alto risco e 6 (13,63%) de risco muito alto. A IPN foi identificada em 31 (70,45%) casos. A alta expressão de Snail1 foi observado em 23 (52,27%) casos no front de invasão/hotspot e 18 (58,06%) na área de IPN. A classificação de Elseragy associou- se à alta intensidade de BT, maior ET e PPI tipo 5. Na estratificação de risco, casos de alto risco ocorreram em tratamentos com cirurgia associada a radioterapia e/ou quimioterapia e os classificados como muito alto risco mostraram relação com metástases à distância. Pacientes com IPN tiveram mediana de sobrevida global reduzida (1126 dias) em comparação aos sem IPN (2815 dias). Conclusão: Conclui- se que a IPN está relacionada diretamente a parâmetros histológicos e tratamentos mais agressivos, assim como, menor tempo de sobrevida, pior prognóstico dos pacientes com CEB e associada ao processo da TEM.

Abstract: Introduction: Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is the most common malignant neoplasm of the oral cavity. Generally, its diagnosis occurs at advanced stages, directly impacting prognosis. After diagnosis, clinical staging of OSCC is performed using the tumor-node-metastasis (TNM) system to determine prognosis and plan treatment. However, other histological parameters can also be explored to predict the biological behavior of OSCC. Among these, perineural invasion (PNI) stands out, which can be influenced by the epithelial-mesenchymal transition (EMT). EMT is associated with cellular changes that facilitate the migration and invasion of neoplastic cells into structures such as lymphovascular invasion and nerves. Objectives: To evaluate whether PNI can be an important prognostic factor in patients with OSCC and to investigate the role of EMT in this invasion process. Methodology: The sample consisted of 44 cases of OSCC. Demographic and clinicopathological information was collected, in addition to follow-up time. The selected cases were classified according to tumor differentiation, tumor budding (TB) intensity, worst pattern of invasion (WPOI), and tumor thickness (TT), with the aid of immunostaining with anti-pan-cytokeratin (AE1/AE3). The Elseragy classification, which considers tumor differentiation and TB intensity, was also applied. PNI was investigated using double immunohistochemical staining (DM) for the antigens AE1/AE3 and S100, and Snail1 and S100. A risk stratification for PNI was also performed for all cases. For EMT evaluation, Snail1 was classified as high or low expression according to the intensity and proportion of nuclear staining. Cells in the invasive front and/or hotspot, as well as cells in the PNI area, were analyzed, with the latter identified by DM with S100. Appropriate statistical tests were applied for each variable, considering results with a<0.05 as significant. Results: Of the 44 OSCC cases included, most involved men, 32 (72.73%). The mean age observed was 57.88±10.99 years. Well-differentiated OSCC cases predominated, 30 (68.18%); with high TB intensity, 34 (77.27%); high TT, 34 (77.28%); and WPOI type 5, 21 (47.73%). According to the Elseragy classification, 34 (77.27%) were reclassified as revised grade III. In risk stratification, 13 (29.54%) cases were low risk, 25 (56.18%) high risk, and 6 (13.63%) very high risk. PNI was identified in 31 (70.45%) cases. High Snail1 expression was observed in 23 (52.27%) cases in the invasive front/hotspot, and 18 (58.06%) in the PNI area. The Elseragy classification was associated with high TB intensity, greater TT, and WPOI type 5. In risk stratification, high-risk cases occurred in treatments involving surgery combined with radiotherapy and/or chemotherapy, and very high-risk cases were related to distant metastases. Patients with PNI had a reduced median overall survival (1126 days) compared to those without PNI (2815 days). Conclusion: It is concluded that PNI is directly related to more aggressive histological parameters and treatments, as well as shorter survival time, worse prognosis in patients with OSCC, and is associated with the EMT process.