O papel da agmatina contra o dano ferroptótico em células HEK-293 e Caenorhabditis elegans

Abstract

A ferroptose é um tipo de morte celular programada caracterizada por intensa peroxidação lipídica, alteração na homeostase do ferro e aumento das espécies reativas de oxigênio (EROs). Níveis elevados de ferro livre no organismo podem gerar EROs, tornando o ambiente tóxico para células ao ponto de ocorrer uma morte ferroptótica (tipo de morte celular regulada e dependente de ferro). O sistema antioxidante é fundamental para o controle das EROs. O Nrf2 é um fator de transcrição importante na regulação de expressão de genes envolvidos na defesa antioxidante e na homeostase de ferro, incluindo a ferritina. A agmatina, um peptídeo endógeno e com vários efeitos benéficos já reportados, surge como um possível modulador da ferroptose, devido a sua capacidade de modular situações de intenso estresse oxidativo e ativação de Nrf2. O objetivo geral deste trabalho é investigar o papel das ferritinas (cadeia leve e pesada) em condições ferroptóticas, além do seu possível envolvimento no efeito protetor da agmatina, contra indutores de ferroptose como o RSL3 (em HEK-293) e FAC (em C. elegans). Para isso, foi realizado uma curva de letalidade em cepas de C. elegans nocaute para FHT1 e FTHL em modelo de iron overload induzido por FAC e teste de viabilidade celular por MTT utilizando células HEK-293 transfectadas com siRNA para a ferritina e tratadas com agmatina, ferrostatina-1 e RSL3. Para os dois experimentos, a comparação entre os grupos foi realizada através da análise de variância ANOVA de uma e três vias, seguidas do teste de posthoc Dunnett e Tukey. Os dados apresentados pela curva de letalidade em C. elegans mostraram que os animais nocaute para FTN1 e FTN2 tratados com FAC tiveram diminuição da sobrevivência em comparação com o grupo controle, corroborando com dados da literatura sobre a importância da ferritina em modelos sobrecarga de ferro em C. elegans. Dados preliminares do grupo ainda não publicados demonstraram que a agmatina protege contra os danos ferroptóticos induzidos por RSL3 100 nM em cultivo celular HEK-293, via ativação de Nrf2, trazendo a importância da ferritina para o contexto, entretanto, os resultados obtidos não demostraram efeito protetor da agmatina contra os dados induzidos por RSL3, uma vez que o indutor ferroptótico RSL3 não causou danos as células, sendo necessária mais padronizações para o modelo experimental, bem como outros experimentos para elucidar a hipótese do projeto.