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Resumo:
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Durante o período intrauterino, as células germinativas primordiais passam por múltiplas mitoses, originando as oogônias, que posteriormente se diferenciam em oócitos primários. Nessa fase, ocorre o reinício da meiose, um processo altamente complexo regulado por vias de sinalização intracelular, próximo ao momento da ovulação nas fêmeas. No contexto da maturação in vitro, quando os oócitos são removidos do ambiente folicular, ocorre o reinício espontâneo da meiose. No entanto, a maturação nuclear impede que esses oócitos adquiram a competência necessária para sustentar o desenvolvimento até o estágio de blastocisto, por meio de diversas modificações citoplasmáticas e moleculares. Neste estudo, investigamos o impacto de um inibidor da Ciclina-dependente de Kinase-1 (CDK-1), conhecido como RO3306, na maturação nuclear in vitro de oócitos bovinos. Os oócitos foram submetidos a três diferentes concentrações de RO3306 (10, 25 e 50µM) durante um período de 12 horas. Posteriormente, eles foram fixados e corados para avaliação a integridade do DNA sob um microscópio de fluorescência, sendo então comparados com um grupo controle sem tratamento. Também foi investigado a reversibilidade do bloqueio meiótico dos oócitos submetidos a 12 horas de tratamento com RO3306, seguidas de mais 22 horas de maturação in vitro. Os resultados revelaram que, no grupo controle, apenas 2% dos oócitos permaneceram bloqueados meioticamente, enquanto nos grupos tratados com 10μM, 25μM e 50μM de RO3306, observou-se que 63%, 61% e 63% dos oócitos, respectivamente, estavam em estágio de vesícula germinativa. Essas diferenças foram estatisticamente significativas, indicando a eficácia do inibidor RO3306 em bloquear a meiose. Além disso, ao analisar a reversibilidade, constatou-se que no grupo controle, 100% dos oócitos atingiram o estágio de metáfase II (MII), enquanto nos grupos tratados com 10μM e 25μM de RO3306, 92% e 87% dos oócitos, respectivamente, alcançaram o estágio MII. Isso demonstra que a reversão do bloqueio meiótico é viável e produz resultados satisfatórios. |
