Estabilidade dos reagentes imuno-hematológicos utilizados para tipagem sanguínea de receptores na técnica de tubo

Abstract

A temperatura de armazenamento dos reagentes imuno-hematológicos, em geral, é de 2-8oC, sendo que a utilização dos mesmos deve ser em temperatura ambiente. A Portaria de Consolidação no 5 do Ministério da Saúde estabelece os parâmetros mínimos de qualidade para a avaliação de cada lote e remessa de reagentes recebidos. Entretanto, não há parâmetros mínimos definidos para os testes da qualidade dos reagentes em uso, expostos com frequência à homogeneização e à temperatura ambiente, além do uso de controles positivos e negativos. Nesse contexto, o objetivo deste estudo foi analisar a estabilidade dos reagentes imuno-hematológicos utilizados para determinação de tipagem ABO e RhD na técnica em tubo. Foram avaliadas a potência, a especificidade e a integridade dos reagentes anti-A, anti-B, anti-D, controle RhD e hemácias A1 e B após longos (oito horas) e curtos (quatro horas) períodos diários de exposição à temperatura ambiente (20-24oC). Os reagentes de hemácias A1 e B também foram expostos diariamente por 11 horas e 30 minutos à temperatura ambiente e mais 30 minutos à temperatura ambiente com simultânea homogeneização em equipamento. Como controle negativo e positivo, uma alíquota dos reagentes foi armazenada permanentemente em temperatura de refrigeração e outra foi exposta diariamente por 12 horas à temperatura ambiente, respectivamente. As alíquotas dos reagentes foram submetidas a diferentes condições durante cinco dias por semana, por quatro semanas. Foram realizados testes de intensidade de reação, titulação e avidez para os antissoros e de intensidade de reação, determinação de hemoglobina livre e condutividade elétrica para os reagentes de hemácias. A intensidade de reação dos antissoros foi de 4+ para todas as condições de exposição e nenhum deles apresentou diminuição da especificidade. Embora pequenas variações não significativas tenham sido observadas após os diferentes períodos de exposição, o título e a avidez dos antissoros analisados atenderam aos requisitos mínimos definidos em legislação. Uma maior concentração de hemoglobina livre foi observada nos reagentes de hemácias expostos à temperatura ambiente com simultânea homogeneização, entretanto, sem causar alterações nos resultados dos testes de potência e especificidade. A condutividade elétrica média das alíquotas dos reagentes de hemácias foi similar em todas as condições. Os resultados apontam que os reagentes imuno-hematológicos analisados são estáveis nas condições de temperatura e manipulação às quais foram submetidos, assegurando a qualidade dos resultados durante o uso dos reagentes nestas circunstâncias.

Abstract: The storage temperature of immunohematological reagents is, in general, 2-8oC, and it's used at room temperature. The Consolidation Ordinance no 5 of the Ministry of Health establishes the minimum quality parameters for the evaluation of each batch and consignment of reagents received. However, there are no minimum specifications defined for the quality testing of reagents while in use, which are frequently exposed to homogenization and room temperature, besides the use of positive and negative controls. In this context, this study aimed to analyze the stability of immunohematological reagents used to determine ABO and RhD typing in the tube technique. The potency, specificity and integrity of anti-A, anti-B, anti-D, RhD control and A1 and B red blood cells reagents were evaluated after long (eight hours) and short (four hours) daily periods of exposure at room temperature (20-24oC). The red blood cell reagents A1 and B were also daily exposed for 11 hours and 30 minutes at room temperature and also 30 minutes at room temperature with simultaneous homogenization in equipment. As negative and positive controls, an aliquot of the reagents was permanently stored at refrigeration temperature and another was exposed daily for 12 hours at room temperature, respectively. The reagent aliquots were submitted to different conditions five days a week for four weeks. Reaction intensity, titration and avidity tests were performed for the antisera and reaction intensity, determination of free hemoglobin and electrical conductivity for the red blood cells reagents. The antisera reaction intensity was 4+ for all exposure conditions and none of them showed a decrease in specificity. Although non-significant small variations were observed after the different exposure periods, the titer and avidity of the analyzed antisera met the minimum requirements defined in legislation. A higher concentration of free hemoglobin was observed in red blood cell reagents exposed to room temperature with simultaneous homogenization, however, without causing changes in the potency and specificity of test results. The electrical conductivity average of the red blood cell reagents aliquots was similar under all exposure conditions. The results indicate that the immunohematological reagents analyzed are stable under the temperature and on-use conditions to which they were submitted, ensuring the quality of the results during the use of the reagents in these circumstances.