Desenvolvimento de ensaio PCR Multiplex para detecção e diferenciação de agentes etiológicos - Revisão de literatura

Abstract

O objetivo deste trabalho foi o de realizar uma revisão de literatura sobre o desenvolvimento de ensaios PCR Multiplex e evidenciar as possíveis afecções que podem ser beneficiadas com esta técnica. Será abordada a metodologia necessária para a escolha dos agentes etiológicos, primers necessários para a amplificação, que tipos de amostras podem ser utilizadas, como realizar a extração de ácidos nucleicos, isolar e identificar o patógeno, como otimizar e padronizar as reações, como estipular a sensibilidade, especificidade, validação do teste e como solucionar as restrições que podem ocorrer. Os benefícios do desenvolvimento da técnica envolvem a facilidade no diagnóstico diferencial de doenças com sinais clínicos semelhantes, rapidez nos resultados e menor uso indiscriminado de medicamentos.

The goal of this paper is to carry out a literature review on the development of Multiplex PCR assays and highlight the possible diseases that can benefit from this technique. The necessary methodology for choosing the etiological agents, the primers needed for amplification, what types of samples can be used, how to extract nucleic acids, isolate and identify the pathogen, how to stipulate the sensitivity, specificity, validation of the assay and how to solve restricting issues that may occur. The development of this technique benefits the differential diagnosis of diseases with similar clinical signs, the speed of results and less indiscriminate use of medication.