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Abstract:
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A utilização de ferramentas in sílico para o desenvolvimento de proteínas artificiais,
aliadas com técnicas de produção, purificação e caracterização, é uma estratégia
poderosa para a produção de partículas com propriedades semelhantes aos
capsídeos icosaédricos virais. Essa sequência de métodos auxilia no entendimento
de como a estrutura conservada das proteínas de capsídeo se relaciona com sua
função, além da produção de novas nanopartículas multifuncionais. Nesse contexto,
o trabalho em questão visou a produção, purificação e caracterização de uma proteína
gerada in silico por evolução artificial guiada com potencial para formação de uma
nanopartícula proteica. A proteína, denominada LDI-CP, foi expressa em sistema
procarioto e purificada parcialmente através de ultracentrifugação utilizando
colchão/gradiente de sacarose e cromatografia. Observações por meio de
microscopia eletrônica de transmissão mostraram que a LDI-CP apresentou formas
achatadas e com diâmetro de 20 nm. Análises físico-químicas demonstraram a
formação de nanopartículas com raio hidrodinâmico de 30 nm estáveis em
temperatura ambiente, indicando uma autoassociação da proteína em solução. Além
disso, foi produzido soro imunorreativo em camundongos anti-LDI-CP, podendo ser
utilizado para sua detecção em futuros trabalhos. Os resultados deste trabalho
contribuirão para a produção de uma VLP artificial com potenciais aplicações como
nanoencapsulação de vacinas ou como possíveis carreadores de drogas para entrega
direcionada. |
