Papel dos receptores Kappa opioides do hipocampo dorsal na consolidação e reconsolidação da memória aversiva contextual

Abstract

Os principais receptores ? opioides (?ORs) já descritos (?1ORs e ?2ORs) são expressos em regiões cerebrais envolvidas no processamento de memórias aversivas, incluindo o hipocampo dorsal (HD). No entanto, o papel dos HD?ORs na consolidação e reconsolidação de memórias aversivas, com intensidades e especificidades variadas, ainda não está claro. Assim, o presente estudo teve como objetivo investigar essa questão utilizando agentes farmacológicos em ratos submetidos a um protocolo de condicionamento aversivo contextual (CAC) fraco, moderado ou forte. A hipótese desse trabalho foi de que o antagonista dos HD?ORs potencializa a consolidação e a reconsolidação de memórias aversivas contextuais mais intensas e generalizadas em ratos, ao passo que o agonista dos ?ORs exerce um papel oposto sobre essas mesmas etapas, sendo a intensidade da experiência associativa aversiva crítica para o envolvimento desses receptores. Em relação à consolidação da memória, o antagonismo de HD?ORs com a nor-binaltorfimina (nor-BNI) imediatamente após um CAC moderado, mas não 6 h após, aumentou a expressão do comportamento de congelamento durante a reexposição ao contexto pareado, o que indica que a ativação dos HD?ORs tem um papel inibitório na consolidação de uma memória aversiva. Um aumento da imunomarcação dos HD?ORs foi observado 1 h e 3 h após o CAC moderado. Essa suprarregulação estava ausente em animais que foram apenas expostos ao contexto ou apenas ao choque, indicando que esse fenômeno requer um pareamento choque-contexto para ocorrer. A microinfusão de nor-BNI também aumentou os níveis de BDNF no HD 90 min após o CAC moderado, sugerindo uma possível via pela qual o antagonismo dos HD?ORs levou à potencialização da consolidação da memória. Além disso, a nor-BNI não induziu alterações sobre o comportamento de congelamento no protocolo de CAC fraco, mas foi capaz de aumentar a expressão do comportamento de congelamento em um contexto novo e não pareado após um CAC forte, indicando que os HD?ORs também modulam a consolidação de uma memória mais intensa e generalizada. Por outro lado, a microinfusão intra-HD do agonista dos ?2ORs, o GR 89696, mas não do agonista dos ?1ORs (U-69593), reduziu a expressão de congelamento no contexto pareado no protocolo de CAC forte. Este efeito parece estar relacionado aos menores níveis de BDNF encontrados no HD 90 min após a microinfusão intra-HD de GR 89696. O pré-tratamento com uma dose subefetiva de nor-BNI preveniu os efeitos do GR 89696 sobre a expressão do comportamento de congelamento. Em relação à reconsolidação da memória, a microinfusão intra-HD de nor-BNI (antagonista ?OR) imediatamente após a reativação da memória, mas não 6 h após, foi capaz de aumentar a expressão de congelamento no contexto novo e não pareado no protocolo de CAC forte, indicando que os HD?ORs também modulam a reconsolidação dessa memória. Nenhum efeito foi observado quando a nor-BNI foi administrada no protocolo de CAC moderado. Além disso, a microinfusão intra-HD de GR 89696 (agonista ?2OR) imediatamente após a reativação da memória, mas não 6 h após, reduziu a expressão de congelamento no contexto pareado no protocolo de CAC forte. Adicionalmente, o comportamento de congelamento não foi reinstalado no grupo GR 89696 após um choque lembrete, indicando que a ativação dos HD?2ORs prejudicou a reconsolidação da memória aversiva. Por outro lado, o efeito do GR 89696 foi prevenido pelo pré-tratamento com uma dose subefetiva de nor-BNI. Em conjunto, as evidências experimentais supracitadas indicam que os HD?ORs regulam negativamente a consolidação e a reconsolidação de memórias aversivas contextuais em ratos com intensidade e especificidade variadas.

Abstract : The main ? opioid receptors (?ORs) already described (?1ORs and ?2ORs) are expressed in brain regions involved in aversive memory processing, including the dorsal hippocampus (DH). However, the role of DH ?ORs in the consolidation and reconsolidation of aversive memories with varied intensity and specificity is still uncertain. The present study aimed to investigate this question using pharmacological agents in rats subjected to weak, moderate or strong contextual aversive conditioning (CAC) protocol. The hypothesis of this work was that DH ?ORs antagonist potentiates the consolidation and reconsolidation of more intense and generalized contextual aversive memories in rats, whereas that DH ?ORs agonist plays an opposite role on these same memory stages, being the degree of intensity of the aversive associative experience critical for the involvement of these receptors. In memory consolidation investigation, antagonism DH ?ORs with nor-binaltorphimine (nor-BNI), immediately after, but not 6 h later, a moderate CAC increased freezing behavior expression during the reexposure to the paired context, indicating that DH ?ORs activation have an inhibitory role in the consolidation of an aversive memory. Increased DH ?ORs immunoblotting content was observed 1 h and 3 h after the moderate CAC. This up-regulation was absent in animals only exposed to the context or to the shock, indicating that this phenomenon requires a shock-context pairing to occur. Nor-binaltorphimine infusion also increased BDNF levels in DH 90 min after CAC moderate, suggesting a possible pathway by which DH ?OR antagonism led to the potentialization of memory consolidation. Moreover, nor-BNI induced no changes in freezing behavior following a weak CAC, but it was able to increase the expression of freezing in novel and unpaired context after a strong CAC, indicating that DH ?ORs also modulate the consolidation of a more intense and generalized memory. On the other hand, infusing the ?2ORs agonist GR 89696, but not the ?1ORs agonist U-69593, into the DH reduced the conditioned freezing expression in the strong CAC protocol. This effect seems to be related to the lower levels of BDNF founded in DH 90 min after intra-DH GR 89696 infusion. Nor-binaltorphimine pretreatment in a sub-effective dose prevented the GR 89696 effects on freezing behavior expression. In memory reconsolidation investigation, intra-DH nor-BNI (?OR antagonist) infusion immediately after, but not 6 h later, memory reactivation was able to increase the expression of freezing behavior in novel and unpaired context in the strong CAC protocol, indicating that DH ?ORs also modulate the reconsolidation of this memory. No effect was observed when nor-BNI was administered in moderate CAC protocol. Moreover, infusing the GR 89696 (?2OR agonist) into the DH immediately after, but not 6 h later, memory reactivation reduced the conditioned freezing expression in the strong CAC protocol. In addition, freezing behavior did not show reinstatement in the GR 89696 group after a reminder shock, indicating that DH ?2ORs activation impaired the reconsolidation of the aversive memory. On the other hand, GR 89696 effect was prevented by pretreatment with a sub-effective dose of nor-BNI. Altogether, the above experimental evidence indicates that DH ?ORs negatively regulate the consolidation and reconsolidation of contextual aversive memories in rats with varied intensity and specificity.