Estudo farmacológico da Jungia sellowii Less., utilizando o modelo da pleurisia induzida pela carragenina, em camundongos

Abstract

Introdução: Jungia é um gênero da família Asteraceae, que compreende arbustos, cipós e ervas e está presente na América do Norte, Central e América do Sul, incluindo o sul do Brasil, onde a espécie Jungia sellowii Less. é encontrada no estado de Santa Catarina. Este gênero é utilizado na medicina popular para tratar inflamação no trato urinário, tonsilite, úlceras estomacais, nefrite, hemorroidas e também é utilizado como um agente desinfetante para tratar infecções geniturinárias. Objetivos: Avaliar o efeito anti-inflamatório do extrato bruto (EB), frações e compostos isolados de Jungia sellowii Less. (Asteraceae), administrados por via intraperitoneal (i.p.), utilizando-se o modelo murino da pleurisia induzida pela carragenina. Metodologia: Folhas frescas foram extraídas com etanol e água para obtenção do EB, que foi fracionado com diferentes solventes de polaridade crescente obtendo-se as frações n-hexano (Hex), diclorometano (DCM), acetato de etila (AcOEt), n-butanol (BuOH) e a fração residual aquosa (Aq). O ácido succínico (AS) e o ácido lático (AL) foram isolados da fração Aq e suas estruturas foram determinadas por ressonância magnética nuclear (1H RMN). Camundongos albinos Swiss, fêmeas, foram utilizados nos experimentos in vivo. O modelo experimental da pleurisia foi induzido por uma injeção intrapleural de Cg (1%) e os parâmetros inflamatórios: migração de leucócitos, concentração de exsudação, atividade da mieloperoxidase (MPO) e adenosina desaminase (ADA), bem como as concentrações dos metabólitos do óxido nítrico (NOx), interleucina-1 (IL-1ß), fator de necrose tumoral-a (TNF-a) e interleucina-17A (IL-17A) foram analisados no lavado da cavidade pleural dos camundongos. A expressão do ácido ribonucleico mensageiro (RNAm) para IL-1ß, TNF-a, IL-17A e também para a óxido nítrico sintase induzida (iNOS) e a avaliação da fosforilação da proteína p65 (p-p65 Fator Nuclear-?B (NF-?B)) foram determinadas no tecido pulmonar após 4 h da indução da pleurisia. Diferenças estatísticas entre os grupos foram determinadas por análise de variância (ANOVA) de duas vias, complementado pelo teste de Newman-Keuls. Valores de p < 0.05 foram considerados significativos. Resultados: Animais tratados com EB (25-50 mg/kg), BuOH (25-50 mg/kg), Aq (5-25 mg/kg), AS (1-2.5 mg/kg) e AL (1-2.5 mg/kg) inibiram a migração de leucócitos e a concentração de exsudação. O EB (25 mg/kh), BuOH (25 mg/kg), Aq (5 mg/kg), SA (1 mg/kg) e LA (1 mg/kh) inibiram a atividade da MPO e da ADA, as concentrações de NOx, IL-1ß, TNF-a, IL-17A, bem como a expressão do RNAm para IL-1ß, TNF-a, IL-17A e iNOS. O AS e o AL inibiram a fosforilação da proteína p65 (p-p65 NF-kB) (p < 0.05). Conclusão: Os resultados demonstraram que Jungia sellowii Less. inibiu a inflamação induzida pela carragenina pela diminuição da migração de leucócitos e da exsudação. Estes efeitos foram relacionados à inibição de citocinas pró-inflamatórias e do óxido nítrico. Ainda, os compostos isolados, AS e AL, podem ter um papel importante neste efeito anti-inflamatório pela inibição de todos os parâmetros inflamatórios estudados e sua ação anti-inflamatória pode estar relacionada à regulação do NF-kB.<br>

Abstract : Introduction: Jungia is a genus from the Asteraceae family, which comprises shrubs, lianas and herbs and it is present in the North America, Central America and South America, including southern Brazil, where the species Jungia sellowii Less. is found in the state of Santa Catarina. This genus is used in traditional medicine to treat urinary tract inflammation, tonsillitis, stomach ulcers, nephritis, hemorrhoids and it is also used as a disinfectant agent to treat genitourinary infections. Objectives: To evaluate the anti-inflammatory effect of the crude extract (CE), its derived fractions and isolated compounds from Jungia sellowii Less. (Asteraceae), administered intraperitoneally (i.p.), using a murine model of pleurisy induced by carrageenan. Methodology: Fresh leaves were extracted with ethanol and water to obtain the CE which was fractionated with different solvents of increasing polarity, yielding n-hexane (Hex), dichloromethane (DCM), ethyl acetate (EtOAc), n-butanol (BuOH) fractions and the residual aqueous fraction (Aq). The succinic acid (SA) and lactic acid (LA) were isolated from the Aq fraction and their structures were determined by nuclear magnetic resonance (1H NMR). Female Swiss mice were used in the in vivo experiments. The experimental model of pleurisy was induced by an intrapleural injection of Cg (1%) and the inflammatory parameters: leukocyte content, degree of exudation, myeloperoxidase (MPO) and adenosine deaminase (ADA) activities, as well as nitric oxide metabolites (NOx), interleukin-1ß (IL-1ß), tumor necrosis factor-a (TNF-a) and interleukin-17A (IL-17A) levels were analyzed in the mouse pleural fluid leakage. The messenger ribonucleic acid (mRNA) expression for IL-1ß, TNF-a, IL-17A and also for inducible nitric oxide synthase (iNOS) and the measurement of p65 protein phosphorylation (p-p65 Nuclear Factor-?B (NF-?B)) were determined in the lung tissue after 4 h of pleurisy induction. Statistical difference between groups were determined by two-way analysis of variance (ANOVA), followed by Newman-Keuls test. Values of p < 0.05 were considered significant. Results: Animals treated with CE (25-50 mg/kg), BuOH (25-50 mg/kg), Aq (5-25 mg/kg), SA (1-2.5 mg/kg) and LA (1-2.5 mg/kg) inhibited leukocyte content and the degree of exudation. The CE (25 mg/kh), BuOH (25 mg/kg), Aq (5 mg/kg), SA (1 mg/kg), and LA (1 mg/kh) inhibited MPO and ADA activities, NOx, IL-1ß, TNF-a, IL-17A levels, as well as the mRNA expression for IL-1ß, TNF-a, IL-17A and iNOS and the p65 protein phosphorylation (p-p65 NF-kB) (p < 0.05). Conclusions: The results demonstrated that Jungia sellowii Less. inhibited the inflammation induced by carrageenan by decreasing the leukocyte content and the degree of exudation. Those effects were related to the inhibition of pro-inflammatory cytokines and nitric oxide. Also, the isolated compounds, SA and LA, may play an important role in this anti-inflammatory effect by inhibiting all the studied pro-inflammatory parameters and its anti-inflammatory action may be related to the regulation of NF-kB.