Identificação e caracterização molecular da big defensina 7 (Cg-BigDef7) da ostra Crassostrea gigas

Abstract

A ostra do Pacífico Crassostrea gigas é uma das espécies aquícolas de maior interesse comercial. Essa espécie se adaptou perfeitamente às condições ambientais da cidade de Florianópolis que se destaca como uma das maiores regiões produtoras de moluscos bivalves do Brasil. Por se tratar de animais filtradores, as ostras estão em constante contato com microorganismos e, para se defenderem de agentes potencialmente patogênicos, esses animais contam com eficientes mecanismos de defesa que incluem a produção de peptídeos antimicrobianos (AMPs). Os AMPs são antibióticos naturais encontrados em diferentes grupos de seres vivos, desde bactérias até mamíferos. As big defensinas são AMPs amplamente encontrados em moluscos bivalves, os quais são compostos por uma região N-terminal hidrofóbica seguida por uma região C-terminal contendo seis resíduos conservados de cisteína organizados como as β-defensinas de vertebrados. Na ostra C. gigas, as big defensinas compreendem uma família multigênica composta por seis membros: Cg-BigDef1 a Cg-BigDef6. O objetivo deste trabalho foi identificar e caracterizar novos membros dessa família de AMPs em ostras. Por meio de buscas in silico em banco de dados anotados e não anotados, foi possível encontrar um novo membro em C. gigas o qual foi denominado de Cg-BigDef7. A sequência aminoacídica deduzida do precursor de Cg-BigDef7 é composta por peptídeo sinal e um pró-domínio seguido de um peptídeo maduro catiônico de 11,26 kDa. Esse gene está localizado no cromossomo 10 e possui três éxons separados por dois íntrons. O primeiro éxon codifica grande parte da região 5’ não traduzida (5’-UTR) enquanto que o segundo éxon codifica a porção final da 5’-UTR, o peptídeo sinal, o pró-domínio e a região N-terminal hidrofóbica do peptídeo maduro. O terceiro éxon codifica a região C-terminal (β-defensina) do peptídeo maduro e a região 3’ não traduzida (3’-UTR). Apesar das diferenças em nível de estrutura primária, todas as sete Cg-BigDefs apresentam uma estrutura tridimensional conservada. A descoberta desse novo AMP amplia o nosso conhecimento acerca dos mecanismos de defesa de ostras, assim como abre novas perspectivas para a descoberta de novos agentes terapêuticos como alternativa ao uso dos antibióticos convencionais.