Participação do Cav2.3 espinhal na hiperalgesia secundária induzida por capsaicina em camundongos

Abstract

A dor neuropática é de difícil tratamento, sendo caracterizada por aumento na responsividade dos neurônios nociceptivos na medula espinhal (sensibilização central). Apesar de ser expresso em neurônios nociceptivos, o papel do Cav2.3 (a subunidade formadora de corrente tipo R de canais de cálcio dependente de voltagem-CCDV) na sensibilização central é pouco compreendido. Assim, o objetivo do presente estudo foi de verificar se o bloqueio ou se a redução de expressão espinhal do CaV2.3 reverte a hiperalgesia secundária induzida por capsaicina em camundongos, em um modelo de sensibilização central preditivo para fármacos eficazes no tratamento da dor neuropática. A injeção intradérmica de capsaicina em camundongos causou nocicepção espontânea nos primeiros cinco minutos e hiperalgesia secundária (avaliada por filamentos de von Frey) de meia até cinco horas após a injeção, de maneira semelhante em machos e fêmeas. O pós-tratamento, mas não o pré-tratamento intratecal com o bloqueador do CaV2.3 SNX-482 reduziu parcialmente e brevemente a hiperalgesia secundária induzida pela capsaicina, em uma dose (300 pmol/sítio) que não causou efeitos adversos. Por outro lado, o pré ou o pós-tratamento intratecal com ?-conotoxina MVIIA (um bloqueador de CaV2.2 usado como controle positivo) reduziu amplamente e longamente a hiperalgesia secundária induzida pela capsaicina, entretanto somente em dose (30 pmol/sítio) que também foi capaz desencadear o surgimento de efeitos adversos. Finalmente, a redução da expressão do Cav2.3 no gânglio da raiz dorsal e medula espinhal causada pelo pré-tratamento intratecal com um oligonucleotídeo antissenso contra o CaV2.3 (2,5 nmol/sítio, de 12/12 horas, por 3 dias), foi capaz de previnir, de maneira robusta e duradoura, a hiperalgesia secundária induzida pela capsaicina, sem causar efeitos adversos. Assim, nossos resultados demonstram que o CaV2.3 participa do processo de sensibilização central, indicando ser um alvo em potencial para o desenvolvimento de novos fármacos mais seguros e eficazes no tratamento da dor neuropática.

Abstract : Neuropathic pain has a difficult treatment, characterized by increased sensitivity of nociceptive neurons in the spinal cord (central sensitization). Despite being expressed in nociceptive neurons, the role of Cav2.3 (the subunit former of the chain type R of voltage gated calcium channel) in central sensitization is poorly understood. Thus, the purpose of the present study was to verify whether the blockade or the knockdown of spinal CaV2.3 expression reverses capsaicin-induced secondary hyperalgesia in mice, a central sensitization model predictive for effective drugs in the treatment of neuropathic pain. Capsaicin intradermal injection in mice caused spontaneous nociception in the first five minutes and secondary hyperalgesia (evaluated by von Frey filaments) from one to five hours post-injection, and similarly in males and females. Post treatment but not intrathecal pretreatment with the CaV2.3 SNX-482 blocker partially and briefly reduced capsaicin-induced secondary hyperalgesia at a dose (300 pmol/site) that did not cause adverse effects. On the other hand, intrathecal pretreatment or post treatment with ?-conotoxin MVIIA (a CaV2.2 blocker used as a positive control) severely and for a longlasting time reduced the capsaicin-induced secondary hyperalgesia, however only at a dose (30 pmol/site) that caused adverse effects. Finally, the reduction of CaV2.3 expression in the dorsal root ganglion and spinal cord caused by intrathecal pretreatment with an antisense oligonucleotide against CaV2.3 (2.5 nmol/site, 12/12 hours for 3 days) was able to prevent, in a robust and longlasting way, the secondary hyperalgesia induced by capsaicin, without causing adverse effects. Thus, our results demonstrate that CaV2.3 is involved in the central sensitization process, indicating that it is a potential target for the development of newer, safer and more effective drugs for the treatment of neuropathic pain.