Métodos estereológicos e não estereológicos para contagem de neurônios imunoreativos para doublecortina no hipocampo de ratos adultos: Uma revisão sistemática da literatura.

Abstract

A neurogênese em mamíferos adultos, desde que foi introduzida, é um campo crescente da neurobiologia. Esse campo apresenta grande dependência de análises quantitativas na extração de resultados e conclusões, através da contagem de neurônios. A Doublecortina (DCX) é uma proteína associada aos microtúbulos que tem forte expressão em precursores neuronais e neurônios imaturos. Essa proteína possui largo uso na marcação de células neonatas, tanto para análise morfológica quanto para sua contagem. Métodos de contagens onde o número absoluto de células é quantificado em uma observação bidimensional de partículas tridimensionais tem se mostrado limitados na confiabilidade das estimativas realizadas. A partir da década de 80 do século XX um novo método chamado estereologia começou a ser mais desenvolvido e introduzido no meio da quantificação histológica. Este novo método foi dito não-enviesado pois eliminava suposições sobre tamanho, forma e disposição das partículas contadas por oferecer uma visão tridimensional das partículas observadas. Subsequentemente foram desenvolvidos aprimoramentos e técnicas nesse método, como o método design-based para definição de amostragem a priori e do método do fracionador óptico, que combina o esquema de amostragem fracionador e o dissector óptico para observação. No presente trabalho foi realizado uma revisão sistemática da quantificação de neurônios imunoistoquimicamente tratados para a marcação da DCX, tanto para trabalhos estereológicos quanto não-estereológicos. No intuito de estabelecer uma comparação e analisar as vantagens do método estereológico, bem como para a extração de dados para o desenvolvimento de protocolo para uma contagem estereológica. Foram analisados 21 trabalhos extraindo-se todos os dados para presentes sobre o método de amostragem utilizados nos mesmos. O resultado da análise indica que a quantidade de informações publicadas não nos permite comparar os erros de contagem entre os métodos estereológicos e não estereológicos na quantificação de DCX no hipocampo de roedores.