Estudo da atividade antibacteriana de isolados do gênero Pisolithus microcarpus

Abstract

Fungos produzem uma ampla diversidade de metabólitos secundários que possuem significativo impacto na sociedade. Dentre os fungos, os basidiomicetos vêm sendo relatados como fontes promissoras de compostos bioativos e antimicrobianos. No presente trabalho, dois isolados fúngicos do gênero Pisolithus microcarpus coletados em duas áreas distintas (degradada pela exploração de carvão, região carbonífera de SC e não degradada em uma cidade do estado de MG) cultivados in vitro foram submetidos à estresse térmico e alteração na composição do meio de cultura contendo o elemento-traço Zn (zinco) e avaliados quanto à produção de compostos bioativos capazes de inibir o crescimento de bactérias potencialmente patogênicas. Inicialmente os fungos foram cultivados em meio Merlin Norkrans Modificado (MNM) por 30 dias à 25 ºC. Após o crescimento três discos com micélio jovem foram retirados das bordas das colônias e transferidos para placas de Petri que continham 25 mL de meio de cultura MNM. As placas foram novamente incubadas por 25 dias em três temperaturas: 25 ºC, 30 ºC e 37 ºC para a verificação da influência da temperatura no crescimento em meio de cultura sólido. Para o cultivo em meio de cultura líquido cinco discos de micélio foram transferidos para frascos tipo Erlenmeyers de 125 mL contendo 50 mL e cultivados nas três temperaturas. Em paralelo os isolados fúngicos foram cultivados em MNM líquido, acrescido de três concentrações de Zn (0,25; 0,50; 1,00 mmol L-1) na forma de ZnSO4.7H2O. Após vinte e cinco dias de incubação dos isolados, para os que apresentaram crescimento, foram feitas as extrações metanólicas do micélio. O solvente foi evaporado utilizando evaporador rotatório e o extrato bruto resultante foi acondicionado em frascos de vidro. Nenhum dos isolados fúngicos apresentou crescimento nos cultivos com meio cultura MNM líquido, acrescido do Zn nas três concentrações testadas. Os ensaios de difusão em disco foram feitos utilizando os extratos metanólicos solubilizados com reagente dimetilsulfóxido (DMSO) em volume proporcional ao peso do extrato. A concentração testada para cada extrato utilizado foi de 0,1 mg/μL. Testes foram executados frente as duas estirpes bacterianas: S. Aureus (ATCC 6538P) e E. Coli (ATCC 8739). As placas foram incubadas à 37 ºC por 24 h e a atividade antibacteriana foi observada pela formação de halos de inibição no entorno dos discos. Somente o isolado fúngico coletado na região carbonífera de Santa Catarina demonstrou atividade antibacteriana frente à S. Aureus, com formação de halos de 18 mm. Para o extrato do isolado UFSC- Pt 222 que apresentou atividade antibacteriana foram feitos ensaios de Concentração Inibitória Mínina (CIM) determinada pelo método de microdiluição. Como resultados obtidos a partir do extrato bruto temos: (CIM) entre 33,3 mg/mL à 16,6 mg/mL para S. Aureus (ATCC 6538P) e 33,3 mg/mL para E. Coli (ATCC 8739). Esses resultados indicam que novos estudos devem ser realizados a fim de identificar e testar esses compostos visando potenciais aplicações biotecnológicas.