Identificação de polimorfismos no gene do IGF-I em bovinos (Bos taurus) da raça Crioula Lageana

Abstract

O gene do IGF-I (Fator I de Crescimento Semelhante à Insulina) é um bom candidato a marcador molecular de bovinos devido a sua relação com características de interesse econômico como funções de crescimento e precocidade sexual, podendo assim ser usado como ferramenta na seleção assistida em programas de melhoramento genético para a espécie. O objetivo desse trabalho foi identificar a possível existência de polimorfismos no gene do IGF-I em bovinos da Raça Crioula Lageana através da técnica PCR-RFLP com a enzima de restrição Hinf-I (Invitrogen). Foi realizada a extração do DNA de amostras de pelos da vassoura da cauda de 66 animais da raça Crioula Lageana de fazendas de criação localizadas na região do município de Lages em Santa Catarina. As análises foram conduzidas no Laboratório de Ensino e Pesquisa em Genética Animal (LEPGA), no Centro de Ciências Agrárias da Universidade Federal de Santa Catarina, em Florianópolis/SC. A extração de DNA foi realizada com uma adaptação da metodologia de PCI (fenol-clorofórmio-álcool isoamílico). A efetividade do procedimento foi verificada por meio de eletroforese em gel de agarose e as amostras consideradas satisfatórias foram amplificadas por meio de PCR, posteriormente os fragmentos obtidos foram submetidos à técnica de PCR-RFLP utilizando a enzima anteriormente mencionada. Foram observados polimorfismos genéticos que originaram três padrões distintos de migração: VV, VS e SS, com frequências observadas iguais a 0,238, 0,587 e 0,175, respectivamente. Testes de aderência indicaram que as frequências para o alelo estudado não estão em equilíbrio de Hardy-Weinberg. Os resultados obtidos neste trabalho permitem inferir que foi possível identificar polimorfismos para a região estudada do gene do IGF-I em animais da raça Crioula Lageana

The IGF-I gene (Insulin-like Growth Factor I) is a good candidate for bovine molecular marker due to its relation with characteristics of economic interest such as growth and sexual precocity functions, and can therefore be used as a tool in assisted selection In breeding programs for species. The aim of this work was to identify the possible existence of polymorphisms in the IGF-I gene in Crioula Lageana breed cattle using the PCR-RFLP technique with the restriction enzyme Hinf-I (Invitrogen). The DNA extraction of samples of broom hairs from the tail of 66 Crioula Lageana animals from farms located in the region of Lages’ city in Santa Catarina was performed. The analyzes were conducted at the Animal Genetics Teaching and Research Laboratory (LEPGA), at the Agricultural Sciences Center of the Federal University of Santa Catarina, Florianópolis / SC. DNA extraction was performed with an adaptation of the PCI (phenol-chloroform-isoamyl alcohol) methodology. The effectiveness of the procedure was verified by agarose gel electrophoresis and the samples considered satisfactory were amplified by PCR technique, later the obtained fragments were submitted to PCR-RFLP technique using the aforementioned enzyme. Genetic polymorphisms were observed by three different migration patterns of DNA fragments after digestion: VV, VS and SS with observed frequencies equal to 0.238, 0.587 and 0.175, respectively. Chi square tests were performed indicating that the allelic frequencies are not under Hardy-Weinberg´s equilibrium. The results obtained allows to conclude that was possible to identify genetic polymorphisms for the studied region on IGF-I hormone gene on animals from “Crioulo Lageano” breed