Avaliação de enxerto de matriz de celulose bacteriana e matriz dérmica acelular (SureDerm) associados ou não à cultura primária de fibroblastos: Estudo em ratos

Abstract

Uma situação corriqueira na clínica odontológica é a presença de recessões e de depressões vestibulares, e a ausência de mucosa queratinizada que trazem problemas estéticos e funcionais, os quais dificultam a manutenção da higiene por parte do paciente. Várias técnicas tem sido introduzidas com a finalidade de aumentar ou criar uma faixa adequada de mucosa. O objetivo deste trabalho foi avaliar in vivo a resposta cicatricial do organismo de ratos a um enxerto de fibroblastos gengivais provenientes de cultura primária associada ao uso de plasma rico em plaquetas (PRP) associado a uma matriz de celulose bacteriana ou matriz dérmica acelular. Para tal foram utilizados 44 animais da linhagem Wistar (Rattus norvegicusalbinus) adultos machos, onde foram operados a área de mucosa jugal bilateral aleatoriamente, divididos em 06 grupos , grupo 1 (n=14) onde foi realizado apenas defeito na área operada (controle negativo), grupo 2 (n=9) onde foi realizado enxerto gengival livre de área doadora do palato, grupo 3 (n=13) realizado colocação de celulose bacteriana na região operada, e grupo 4 (n=6), foi realizado colocação de matriz dérmica acelular (SureDerm®) na região operada, grupo 5 (n=10), celulose bacteriana associada à cultura primária de fibroblastos e grupo 6 (n=6), matriz dérmica acelular associada à cultura primária de fibroblastos. Distribuídos aleatoriamente e operados de maneira randômica no período experimental de 15 dias, os animais foram anestesiados para a análise clínica e realização de biópsias excisionais das áreas operadas. As amostras removidas de região de mucosa jugal foram fixadas, destinadas ao processo histológico e incluídas em parafina. Os cortes de 5 μm de espessura foram coradas com Hematoxilina-Eosina e as lâminas histológicas analisadas de maneira qualitativa através da microscopia de campo claro. As amostras celulares foram removidas na 6a passagem. Foram avaliados clinicamente para todos os grupos: presença clínica de queratina; presença clínica de tecido granulomatoso; presença de ulceração; continuidade do epitélio; regularidade do epitélio; presença clínica de rubor; presença clínica de edema; presença visível do arcabouço. Foram avaliados histológicamente para todos os grupos: presença de crista epitelial; interrupção na continuidade do epitélio; espessura do epitélio; camada de queratina; presença de infiltrado inflamatório no conjuntivo; características do conjuntivo, rico em fibras ou rico em células; presença de vasos sanguíneos, dilatados ou normais; áreas de hemorragias. Os resultados clínicos sugerem o que o grupo 6 teve melhor cicatrização, tendo aspectos semelhantes ou superiores ao grupo controle positivo. Os resultados histológicos sugerem que o grupo 6 teve boa resposta, porem todos os grupos foram similares entre si. Concluímos que o grupo 6 apresentou os melhores aspectos de cicatrização desta pesquisa, porem estudos futuros são necessários para utilização clínica em humanos destas técnicas de engenharia tecidual reconstrutivas.

A routine situation in the odontological clinic is the presence of recessions and vestibular depressions, and absence of keratinized mucosa that bring aesthetic and functional problems, which hamper the maintenance of hygiene on the part of the patient. Several techniques have been introduced with the purpose of increasing or create a proper range of mucosa. The objective of this work was to evaluate the in vivo cicatricial response of the rats organism to a gingival fibroblasts graft from primary culture associated with the use of platelet-rich plasma (PRP) associated with a bacterial cellulose matrix or acellular dermal matrix. For such, 44 Wistar lineage (Rattus norvegicusalbinus ) animals were used, adult males, where the area of bilateral jugal mucosa was randomly operated, divided in 06 groups , group 1 (n=14) where only defect in the operated area was perfomed (negative control), group 2 (n=9) where free gingival graft from the palate was performed , group 3 (n=13) where placement of bacterial cellulose in the operated region was performed, and group 4 (n=6), performed placing acellular dermal matrix (SureDerm ®) in the operated region, group 5 (n=10), bacterial cellulose associated to primary culture of fibroblasts and group 6 (n=6), acellular dermal matrix associated to primary culture Of fibroblasts. Randomly distributed and operated in the experimental period of 15 days, the animals were anesthetized for clinical analysis and excisional biopsy of the operated areas . The samples removed from the region of jugal mucosa were fixed, intended for the histological process and included in paraffin. The 5 μm thick sections were stained with Hematoxylin-Eosin and the histological slides analyzed qualitatively through the clear field microscopy. All groups were clinically evaluate on: clinical presence of keratin; clinical presence of granulomatous tissue; presence of ulceration; continuity of epithelium; regularity of epithelium; clinical presence of redness; clinical presence of edema; visible presence of the scaffold. All groups were evaluated histologically for: presence of the epitelial crest; interruption in the continuity of the epithelium; thickness of epithelium; keratin layer; presence of inflammatory infiltrate in the connective tissue; characteristics of connective tissue, rich in fibers or rich in cells; presence of blood vessels, dilated or normal; areas of hemorrhages. The clinical results suggest that group 6 had better healing, with aspects similar or superior to that of the positive control group. The histological results suggest that the group 6 had good response, but all groups were similar between themselves. We concluded that the group 6 presented the best healing aspects of this research, but further studies are needed for clinical use of these reconstructive tissue-engineering techniques in humans.