Triagem in vitro de compostos isolados de plantas com potencial atividade imunomodulatória sobre linfócitos B

Abstract

A etiologia de diversos distúrbios clínicos associados ao sistema imune é conferida a desordens autorreativas ou deficiências na resposta humoral dos linfócitos B. A experimentação in vitro tem se mostrado viável na bioprospecção de produtos naturais, considerados fonte inesgotável de compostos com potenciais atividades biológicas e farmacológicas. O presente trabalho realizou a triagem in vitro de compostos isolados de plantas com potencial atividade imunomodulatória sobre linfócitos B. Utilizou-se o ensaio de redução do brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazólio (MTT) para determinar a citotoxicidade de oito compostos selecionados sobre células da linhagem linfoblatoide SKW 6.4. Em consoante, foram realizados ensaios imunoenzimáticos (ELISAs) para a titulação de imunoglobulinas totais secretadas por células SKW 6.4 em condições normais de cultura e sob o estímulo dos compostos selecionados. Metade dos compostos mostrou atividade citotóxica sobre as células empregadas através do ensaio de MTT, enquanto a outra metade foi capaz de reduzir o brometo de tetrazólio mesmo na ausência de células viáveis. Contagens em câmara hemocitométrica, na presença do corante Azul de Tripan, determinaram a viabilidade de células SKW 6.4 quando incubadas com os compostos capazes de reduzir diretamente o MTT, confirmando a citotoxicidade dos mesmos quando em altas concentrações. A titulação de imunoglobulinas totais secretadas pelas células demonstrou perfis de citotoxicidade semelhantes aos observados nos ensaios de MTT para todos os compostos. Os resultados globais alcançados neste estudo demonstraram que todos os compostos testados possuem efeitos citotóxicos, não apresentando atividade imunomodulatória sobre a linhagem linfoblastoide utilizada. Concluiu-se, ainda, que parte dos compostos analisados é capaz de reduzir diretamente o brometo de tetrazólio, trazendo questionamentos quanto à viabilidade da utilização do ensaio de MTT para determinação de citotoxicidade e triagem de compostos naturais, embora seja uma metodologia amplamente utilizada.